OMgp不同結構域在神經突起生長抑制中的作用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、為了對OMgp結構與功能的關系有進一步的了解,我們克隆了小鼠OMgpcDNA,按照其結構特征分段表達了含有不同結構域的OMgp蛋白.通過與表達有NgR的CHO細胞的結合實驗、GST沉降實驗和對原代培養(yǎng)的海馬錐體細胞的抑制試驗證明,OMgp LRR在其神經突起生長抑制功能中起重要作用,單獨的LRR結構域具有與全長OMgp蛋白幾乎相同的神經突起生長抑制功能,而刪除了此結構域的蛋白則失去了對神經突起的抑制作用.含有部分LRR結構域的蛋白也有較

2、強的作用,這提示,OMgp在完成其神經突起抑制功能時,可能并不是每個亮氨酸重復序列結構域都是必須的.為了進一步鑒定OMgp與NgR作用的最小單位,該研究使用基因突變法分別刪除了OMgp LRR的不同亮氨酸富含重復序列,表達蛋白后對其功能進行研究.結果表明,刪除了LRR25-56、57-133、134-180的蛋白片段沒有明顯的功能改變,而刪除了第181-228位氨基酸的LRR蛋白雖然仍具有結合NgR的功能,但卻失去了對神經突起的生長抑制

3、功能.這提示,在OMgp與NgR結合時,可能存在多個結合位點,而LRR181-228則可能是OMgp最重要的功能結構域.刪除了LRR181-228的OMgp片斷失去了對神經突起的生長抑制功能,但仍具有結合NgR的功能,有可能作為神經生長抑制因子的競爭劑用于促進CNS損傷后神經的再生.由于目前還未得到OMgp的晶體結構,該研究使用同源模建的方法模擬了OMgp的三維結構并進行了初步分析,為進一步對神經突起生長抑制因子與配體相互作用及神經再生

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