細胞色素P450酶系基因多態(tài)性與鼻咽癌易感性的關聯(lián)研究.pdf

1、研究背景與目的研究表明生物代謝基因是一類重要的影響腫瘤發(fā)病的易感基因,細胞色素P450酶(CYP450)多基因家族是一類重要的代謝酶基因,其中有30多個家族成員(同工酶)存在于人體內,但是目前鼻咽癌易感基因研究只涉及其中的兩個成員CYP2E1、CYP1A1.為了尋找更多與廣東地區(qū)鼻咽癌易感有關的CYP450基因多態(tài),我們分析了CYP450基因在鼻咽組織中的表達狀況,并對鼻咽組織表達陽性的3個CYP450基因進行PCR-測序,篩查散發(fā)鼻咽

2、癌患者的CYP450基因的序列變異,然后選擇一些位點進行病例一對照分析,檢測其與鼻咽癌易感的關聯(lián),以期為鼻咽癌的人群篩查、診斷、預防提供有意義的分子標記物.研究方法與結果細胞色素P450酶系在鼻咽癌及非癌組織的表達目的:了解鼻咽部組織CYP450基因的轉錄表達狀況.方法:從鼻咽癌及鼻咽炎的非癌組織提取RNA,以兩種方法檢測CYP450基因的表達.(1)混合7例鼻咽非癌組織的RNA構建cDNA文庫,進行克隆測序及生物信息學分析,檢測CYP

3、450基因的表達;(2)逆轉錄14例鼻咽癌組織及8例非癌組織的RNA為cDNA,以PCR擴增檢測CYP450基因的表達.CYP2F1、CYP2A13和CYP4B1基因序列分析目的:分析鼻咽癌病人的CYP2A13、CYP2F1、和CYP4B1三個基因的多態(tài)性,尋找與鼻咽癌易感有關的CYP450基因多態(tài).選擇CYP2A13是因為最新研究表明該基因主要在呼吸道高表達,并且代謝煙草中的致癌物4-甲基亞硝胺-1-(3-吡啶)-1-丁酮(NNK)的

4、活性非常高;選擇CYP4B1、CYP2F1是因為這2個基因在鼻咽cDNA文庫和RT-PCR都檢測有表達.方法:收集472例散發(fā)性鼻咽癌病人和709例正常對照的全血標本,采用德國Qiagen公司的QIAamp DNA B1ood Midi kit試劑盒提取全血DNA.先采用PCR直接測序法在40-45例鼻咽癌病人全血DNA中對CYP2A13、CYP2F1和CYP4B1三個基因進行了突變檢測.再用PCR-RFLP和PCR-直接測序法檢測CY

5、P2A13基因的4多態(tài)位點在大樣本的鼻咽癌病人和正常人中的頻率.統(tǒng)計學分析采用x<'2>檢驗.結論 該研究首次檢測了鼻咽癌及非癌組織CYP450基因的表達,結果表明鼻咽部CYP450基因表達種類較多,其中部分基因的功能與致癌物的活化有關,這些基因是否與鼻咽癌易感有關值得進一步研究.CYP2A13基因在鼻咽癌病人中存在序列變異,通過大樣本分析其中4個高頻或引起氨基酸改變的多態(tài),結果表明這些多態(tài)的頻率在鼻咽癌和正常人之間的差異沒有顯著意義.