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1、【目的】:研究多胺(精脒)及多胺合成抑制劑DFMO一定濃度對PC12細胞生長特性的影響,同時探討在其作用下PC12細胞MAPKs信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路活化表達的特點及其相互之間的關(guān)系。 【方法】:取對數(shù)生長期嗜鉻細胞瘤細胞株P(guān)C12細胞,按照作用劑的不同分為兩組,即SPD組(分別含SPD1.25,2.5,5,10mmol/L)和DFMO組(分別含DFMO2,4,6,8mmol/L),分別培養(yǎng)4天,每天觀察PC12細胞生長情況。光鏡顯微鏡下觀察
2、細胞形態(tài)學(xué)變化;臺盼藍染色法繪制細胞生長曲線;用四氮唑鹽(MTT)比色試驗檢測細胞的生長或抑制;流式細胞儀檢測細胞周期分布。同時用western-blot法檢測ERK1/2和p38蛋白磷酸化水平,觀察多胺對PC12細胞生長信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的影響。 【結(jié)論】:SPD在一定濃度范圍內(nèi)對PC12細胞生長具有促進作用,DFMO在一定濃度范圍內(nèi)對PC12細胞則具有抑制作用。精脒通過ERK1/2磷酸化升高和p38磷酸化降低導(dǎo)致PC12細胞增殖;而D
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