SHP-1、JAK3、SOCS4與SOCS5在急性白血病中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、目的： JAK-STAT(Janus Kinase-Signal Transudcer andActivator of Transcription)是體內(nèi)生理和病理反應(yīng)的信號傳遞通路之一，與多種疾病的發(fā)病及防治關(guān)系密切。該途徑的活化是調(diào)節(jié)細(xì)胞功能的重要機(jī)制之一。造血生長因子通過JAK-STAT途徑結(jié)合于相應(yīng)受體，調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而影響DNA表達(dá)以及造血細(xì)胞生長和功能。SHP-1為含SH2域(src homology-2 domai

2、n)的酪氨酸磷酸酶，主要表達(dá)于造血細(xì)胞，因此又稱為造血細(xì)胞磷酸酶(Hematopoietic cellphosptlatase，HCP，也稱為SHP-1或SHPTP1)。SHP-1對受體酪氨酸激酶的抑制作用是通過直接作用于受體使其脫磷酸化完成，而對細(xì)胞因子受體的抑制作用則是通過與受體的非催化亞單位結(jié)合使相關(guān)的Janus家族酪氨酸激酶脫磷酸化而實(shí)現(xiàn)。1997年以來，連續(xù)發(fā)現(xiàn)一系列能抑制細(xì)胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的蛋白-SOCS(suppressor

3、s of cytokine signaling，細(xì)胞因子信號抑制蛋白)，這是一類新型的免疫抑制分子，可抑制多種細(xì)胞因子、激素和生長因子的生物學(xué)作用。SOCS分子主要通過抑制JAK-STAT通路抑制信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而對細(xì)胞因子、激素、生長因子作用的強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間進(jìn)行調(diào)控。本研究旨在檢測本研究旨在檢測SHP-1、JAK3、SOCS4與SOCS5基因在白血病中表達(dá)并分析其臨床意義。 方法：為了評價(jià)SHP-1、JAK3、SOCS4與SOCS

4、5基因在急性白血病發(fā)病中的作用，我們以定量及半定量RT-PCR的方法檢測了103例急性白血病患者，其中46為初治患者(AL)，57例緩解期(CR)患者和31例健康人骨髓或外周血標(biāo)本(NC)中單個(gè)核細(xì)胞中SHP-1、JAK3、SOCS4與SOCS5基因的表達(dá)情況。 結(jié)果： 1、采用定量及半定量RT-PCR檢測SHP-1、JAK3、SOCS4、SOCS5在AL、CR和NC組中表達(dá)水平 1．1 SHP-1mUNA在AL

5、、CR和NC組表達(dá)的陽性率和平均水平分別為39.13％(18/46)和1.50×10<'4>、96.49％(55/57)和1.79×10<'4>以及100％(31/31)和1.89×10<'4>。AL組與NC組相比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(兩個(gè)樣本均數(shù)比較的t檢驗(yàn)，P=0.0370<0.05，SHP-1符合正態(tài)分布W=0.944065，P=0.3193>0.1)。CR組與NC組相比，沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(兩個(gè)樣本均數(shù)比較的t檢驗(yàn)，P=0.4128>0.

6、05)。AL組與CR組相比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(兩個(gè)樣本均數(shù)比較的t檢驗(yàn)，P=0.0485<0.05)。 1.2 JAK3mRNA在AL、CR和NC組表達(dá)的陽性率和平均水平分別為67.39％(31/46)和0.590、56.14％(32/57)和0.614以及58.60％(18/31)和0.490。AL組與CR組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(兩個(gè)樣本均數(shù)比較的t檢驗(yàn)，P=0.0155<0.05)，CR組與NC組相比，沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(兩個(gè)樣本均數(shù)比

7、較的t檢驗(yàn)，P=0.3820>0.05)。AL組與NC組相比，沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(兩個(gè)樣本均數(shù)比較的t檢驗(yàn)，P=0.2216>0.05)。 1．3 SOCS4mRNA在AL、CR和NC組表達(dá)的陽性率和平均水平分別為56.52％(26/46)和0.464、70.12％(40/57)和0.727以及87.10％(27/31)和0.614。AL組與CR組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(兩個(gè)樣本均數(shù)比較的t檢驗(yàn)，P=0.0378<0.05)CR組與NC組

8、相比，沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(兩個(gè)樣本均數(shù)比較的t檢驗(yàn)，P=0.8007>0.05)。AL組與NC組相比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(兩個(gè)樣本均數(shù)比較的t檢驗(yàn)，P=0.0221<0.05)。 1．4 SOCS5 mRNA在AL、CR和NC組表達(dá)的陽性率和平均水平分別為45.65％(21/46)和0.585、82.46％(47/57)和0.596以及64.52％(20/31)和0.711。AL組與CR組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(兩個(gè)樣本均數(shù)比較的t檢驗(yàn)，P=

9、0.0094<0.05)，CR組與NC組相比，沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(兩個(gè)樣本均數(shù)比較的t檢驗(yàn)，P=0.3900>0.05)。AL組與NC組相比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(兩個(gè)樣本均數(shù)比較的t檢驗(yàn)，P=0.0011<0.05)。 2、AL組SHP-1與JAK3mRNA表達(dá)水平的相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)兩者的mRNA水平呈負(fù)相關(guān)(直線相關(guān)與回歸分析，r=-0.3066，P=0.0382<0.05)。JAK3與SOCS4mRNA表達(dá)水平的相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)兩者的mRNA

10、水平呈負(fù)相關(guān)(直線相關(guān)與回歸分析，r=-0.2931，P=0.0481<0.05)。JAK3與SOCS5mRNA表達(dá)水平的相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)兩者的mRNA水平呈負(fù)相關(guān)(直線相關(guān)與回歸分析，r=-0.6001，P=0.0001<0.05)。 3、持續(xù)追蹤6例急性白血病患者其初治、緩解一個(gè)月、緩解三個(gè)月和緩解半年的自身SHP-1 mRNA表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)初治組與緩解一個(gè)月組、緩解三個(gè)月組和緩解半年組相比SHP-1mRNA表達(dá)水平有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

11、(成組設(shè)計(jì)多個(gè)樣本比較的秩和檢驗(yàn)P=0.0327<0.05)，并且初治組與其他三組差別有顯著性，三個(gè)緩解組之間差別沒有顯著性。 結(jié)論： 1、急性白血病初治組患者SHP-1mRNA表達(dá)水平明顯低于正常對照組，提示SHP-1可能參與急性白血病的發(fā)生與發(fā)展，低表達(dá)是急性白血病發(fā)病的指標(biāo)之一。 2、急性白血病初治組患者細(xì)胞中JAK3表達(dá)水平明顯高于正常對照組，SHP-1 mRNA低表達(dá)患者JAK3表達(dá)水平較高，提示白血

12、病細(xì)胞中SHP-1對JAK3的抑制作用減弱。 3、急性白血病初治組患者細(xì)胞中SOCS4表達(dá)水平明顯低于正常對照組，JAK3mRNA高表達(dá)患者SOCS4表達(dá)水平較低，提示血細(xì)胞癌變時(shí)SOCS4對JAK3的抑制作用降低。因此，SOCS4表達(dá)水平降低的同時(shí)JAK3相應(yīng)高表達(dá)。 4、急性白血病初治組患者細(xì)胞中SOCS5表達(dá)水平明顯低于正常對照組，JAK3mRNA高表達(dá)患者SOCS5表達(dá)水平較低，提示血細(xì)胞癌變時(shí)SOCS5對JAK