IL-23-Th17炎癥軸在慢性EAE發(fā)病機制中的研究.pdf

1、目的：運用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)測定IL-23p19、IL-17、IL-6在慢性EAE模型C57BL/6小鼠腦組織中的動態(tài)表達變化，并用TGF-β1進行干預(yù)，觀察其變化，以探討IL-23/Th17細胞炎癥軸在慢性EAE病程中的作用。 方法：72只近交系清潔級8-10周健康雌性C57BL/6J小鼠，隨機分為佐劑組、致病組、干預(yù)組和假干預(yù)組。各組小鼠又分為發(fā)病初、發(fā)病高峰和慢性期組。致病組用人工合成的MOG<,35-55

2、>和自制的完全弗氏佐劑免疫C57BL/6J小鼠制成慢性EAE動物模型。干預(yù)組在免疫同時，每只小鼠注射TGF-β1。假干預(yù)組在免疫同時注入PBS作為干預(yù)組對照。佐劑組注入完全弗氏佐劑。按Benson評分標準做EAE嚴重性的臨床評估。用RT-PCR技術(shù)檢測佐劑對照組、致病組、干預(yù)組和假干預(yù)組發(fā)病初、發(fā)病高峰和慢性期組腦組織IL-17、IL-23p19、IL-6tuRNA的表達變化。 結(jié)果： 1.動物模型： 慢性EAE

3、致病組在第一次免疫后14-20天發(fā)病，20-24天達高峰，28-32天緩解，發(fā)病小鼠體重明顯減輕：干預(yù)組體重減輕，13-17天發(fā)病，17-22天到達高峰，更易趨于緩解。假干預(yù)組臨床表現(xiàn)和發(fā)病特點同致病組。佐劑組體重呈增加趨勢，Benson標準評分為0分。 2.RT-PCRIL-23p19、IL-6和IL-17mRNA在佐劑組呈低表達，在假干預(yù)組各期表達與致病組無差異(P>0.05)。 2.1 致病組IL-23p19發(fā)病初

4、期表達升高；高峰期表達有下降(兩者相比有統(tǒng)計學(xué)意義，P<0.05)；慢性期表達下降，但和高峰期無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。干預(yù)組IL-23p19表達，在各期均較致病組下降，并有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。 2.2 致病組IL-17在發(fā)病初期表達升高，高峰期升高明顯(相比有統(tǒng)計學(xué)差異，P<0.05)，緩解期下降，但與高峰期相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。假干預(yù)組各期表達與致病組無差異(P>0.05)。干預(yù)組IL-17表達在

5、發(fā)病初期升高，但與致病組沒有統(tǒng)計學(xué)差異。在發(fā)病高峰期升高較致病組明顯，并有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)，在緩解期較致病組表達下降，并有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。 2.3 致病組IL-6表達在發(fā)病初期就已升高，高峰期升高明顯，緩解期無明顯下降，三時期比較無明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。假干預(yù)組各期表達與致病組無差異(P>0.05)。 干預(yù)組IL-6的表達，在發(fā)病初期、高峰期和緩解期表達均較相應(yīng)致病組升高，并有統(tǒng)計學(xué)差異(