M2型丙酮酸激酶在人胃癌BGC-823細(xì)胞中的生物學(xué)功能及其機(jī)制.pdf

1、目的:明確PKM2在人胃癌細(xì)胞株的表達(dá)情況，并應(yīng)用siRNA技術(shù)驗(yàn)證PKM2對胃癌細(xì)胞增殖、遷移及調(diào)亡等生物學(xué)功能的影響；初步探討PKM2在胃癌細(xì)胞中發(fā)揮作用的機(jī)制，從而為更深入的研究和早期胃癌診斷及分子靶向治療提供新的思路和理論依據(jù)。
　　方法：本研究通過培養(yǎng)不同分化程度胃癌細(xì)胞株，利用半定量RT-PCR，Western-blot等方法在mRNA和蛋白水平，對胃癌中PKM2的表達(dá)進(jìn)行多方法的研究驗(yàn)證。并以BGC-823作為研究對

2、象，將合成的PKM2-siRNA序列轉(zhuǎn)染至細(xì)胞內(nèi)，下調(diào)PKM2表達(dá)，通過熒光定量PCR及Western-blot驗(yàn)證干擾效果，同時利用CCK8，Transwell及流式細(xì)胞分析術(shù)在BGC-823胃癌細(xì)胞中初步探討了PKM2在胃癌中的功能及機(jī)制。
　　結(jié)果：在細(xì)胞層面，從mRNA和蛋白水平檢測發(fā)現(xiàn)，PKM2在不同分化程度的人胃癌細(xì)胞系及永生化人胃粘膜上皮細(xì)胞之間均存在表達(dá)差異，PKM2表達(dá)量隨細(xì)胞分化程度的升高而降低，兩種實(shí)驗(yàn)方法檢