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1、目的:研究水飛薊賓對腺樣囊性癌實驗性肺轉(zhuǎn)移的抑制作用并探討其機制。
方法:20只雌雄各半3~4周齡BALB/c nu/nu裸鼠隨機分為實驗組和對照組,每組10只。經(jīng)尾靜脈注射0.2ml細胞密度為1×106/ml的唾液腺腺樣囊性癌肺高轉(zhuǎn)移細胞(ACC-M)懸液。24h后,對照組裸鼠每天腹腔注射0.8ml RPMI-1640培養(yǎng)液,實驗組裸鼠每天腹腔注射0.8ml經(jīng)RPMI-1640稀釋的水飛薊賓溶液(濃度:1mg/ml)。6W后
2、處死裸鼠,分別檢測兩組裸鼠的肺重量、肺腫瘤結(jié)節(jié)數(shù)目及大小。采用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、免疫印跡法(Western blot)和免疫組化(IHC)檢測裸鼠肺部腺樣囊性癌轉(zhuǎn)移灶自噬相關(guān)基因LC3的表達,應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析,P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。
結(jié)果:對照組裸鼠肺重量為(4.20±0.06)g,實驗組肺重量為(4.08±0.11)g;對照組裸鼠左、右肺腫瘤結(jié)節(jié)數(shù)為(9.29±5
3、.91)個和(10.71±7.83)個,實驗組裸鼠左、右肺腫瘤結(jié)節(jié)數(shù)為(3.11±3.76)個和(2.22±3.46)個;實驗組裸鼠肺重量及左、右肺腫瘤結(jié)節(jié)數(shù)均顯著低于對照組(P<0.05),差異具有統(tǒng)計學意義。LC3 mRNA在實驗組裸鼠腺樣囊性癌肺轉(zhuǎn)移灶組織中相對表達量為(0.784±0.103)顯著高于對照組(0.685±0.077),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ蛋白在實驗組裸鼠肺轉(zhuǎn)移灶中的相對表達量(
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