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1、本文對米曲霉單寧酶產(chǎn)酶條件進行了研究,結(jié)果表明:除誘導(dǎo)劑1(單寧)外,誘導(dǎo)劑2也能誘導(dǎo)米曲霉產(chǎn)單寧酶。采用國內(nèi)尚未見報道的新思路來誘導(dǎo)米曲霉產(chǎn)單寧酶:首先用營養(yǎng)較豐富的產(chǎn)菌培養(yǎng)基培養(yǎng)生長旺盛的菌絲體,然后再用含有誘導(dǎo)劑(誘導(dǎo)劑2)的誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)菌絲體產(chǎn)酶,所得的單寧酶活力比直接用含誘導(dǎo)劑的產(chǎn)菌培養(yǎng)基誘導(dǎo)產(chǎn)酶的高1.5倍左右。用該方法產(chǎn)單寧酶的的最適誘導(dǎo)條件為:誘導(dǎo)培養(yǎng)基含1.5%誘導(dǎo)劑2,起始pH 5.0,30℃培養(yǎng)72 h。采用優(yōu)化
2、的產(chǎn)酶條件所得到的單寧酶活力達1 67.4 U/mL發(fā)酵液,比使用單寧做為誘導(dǎo)劑所得的單寧酶活力高約1.5倍。 對米曲霉所產(chǎn)單寧酶的酶學(xué)性質(zhì)進行了初步研究,結(jié)果表明,該酶的酶促反應(yīng)最適溫度為42℃,最適pH值為6.5。同時,該酶在50℃以下,pH3.0-7.5范圍內(nèi)均比較穩(wěn)定。以殼聚糖作為載體.戊二醛為交聯(lián)劑,采用交聯(lián)的方法將單寧酶固定。結(jié)果表明,酶活力固定率為73.86%;固定化酶的最適酶促反應(yīng)溫度為50℃,比游離單寧酶提高8
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