治療超聲聯(lián)合微泡溶解體外血栓的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景：
　　隨著超聲微泡造影劑研制技術(shù)的不斷提高，超聲造影在實(shí)驗(yàn)研究以及臨床應(yīng)用中得到了越來(lái)越廣泛地應(yīng)用。目前在臨床診斷中，超聲造影已成為較常用的診斷方法。超聲微泡造影劑除了應(yīng)用于臨床診斷外，在治療領(lǐng)域中也逐漸受到了越來(lái)越多的關(guān)注，如輔助溶栓、藥物的傳輸、靶向基因轉(zhuǎn)染、突破生物學(xué)屏障等方面，具有廣闊的應(yīng)用前景。從上世紀(jì)90年代開始，就有不少國(guó)內(nèi)外的學(xué)者研究了單純超聲或微泡聯(lián)合超聲的體內(nèi)外溶栓作用，但是對(duì)于超聲溶栓治療的優(yōu)化研究仍缺

2、乏系統(tǒng)性，優(yōu)化參數(shù)的設(shè)置尚未達(dá)成明確的共識(shí)。如何優(yōu)化超聲參數(shù)的設(shè)置對(duì)于超聲聯(lián)合微泡在臨床治療中的應(yīng)用是極為重要的。
　　研究目的：
　　本實(shí)驗(yàn)旨在研究微泡增強(qiáng)的體外治療超聲（ETUS）對(duì)體外血栓的溶解機(jī)制，并初步研究不同超聲參數(shù)（如超聲占空比、超聲聲壓）對(duì)微泡造影劑聯(lián)合超聲溶解體外血栓的影響。
　　材料與方法：
　　一、血栓的制備
　　取健康志愿者全血共112ml，分成112份，每份約1ml，置于1.5m1

3、塑料EP管內(nèi)，在37℃恒溫水浴箱內(nèi)浸浴3h后，將血栓存儲(chǔ)于5℃的冰箱3天，以獲得穩(wěn)定的血栓。實(shí)驗(yàn)前用生理鹽水將血栓沖洗3遍，濾紙吸干后用電子天平稱量血栓的初始質(zhì)量(Wo)。
　　二、實(shí)驗(yàn)方案
　　所有實(shí)驗(yàn)過程均在37℃的恒溫箱中進(jìn)行。采用的是脈沖式聚焦超聲治療儀，超聲治療儀的治療方式均設(shè)為4（即治療4s間歇4s的交替治療方式），超聲輻照時(shí)間均設(shè)為30min。實(shí)驗(yàn)分成兩部分。實(shí)驗(yàn)第一部分：固定超聲治療儀的超聲輸出聲壓為6檔(5

4、.47MPa)，將超聲治療儀的占空比分別設(shè)為0.216％、1.080%、3.600%、7.200%，共4種，根據(jù)有無(wú)超聲治療或有無(wú)微泡注入共分成10組。實(shí)驗(yàn)第二部分：固定超聲治療儀的占空比為7.200%，將超聲治療儀的超聲聲壓分別設(shè)為6檔(5.47MPa)、3檔(3.75MPa)、1檔(2.80MPa)，并根據(jù)有無(wú)微泡注入共分成8組。各組血栓治療后立刻取出血栓，并用生理鹽水沖洗、濾紙吸干、稱重（W1），計(jì)算各組的溶栓率P=[(W0—W1

5、)/W0]×100%。
　　三、病理檢查
　　對(duì)溶栓后血栓進(jìn)行切片、HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀察血栓內(nèi)部結(jié)構(gòu)。
　　四、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
　　溶栓率均以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(SX±）表示，兩組間比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)，多組之間比較采用單方向方差分析。檢驗(yàn)均以　　結(jié)果：
　　一、各組溶栓率比較：在相同的條件下，治療超聲

6、聯(lián)合微泡均比單純治療超聲的溶栓率高。
　　1.實(shí)驗(yàn)第一部分，超聲聲壓和其它參數(shù)設(shè)置恒定時(shí)，占空比越高則溶栓率越高。當(dāng)占空比設(shè)為7.200%的條件時(shí)，微泡聯(lián)合治療超聲的溶栓率最高，與其它各組比較均有顯著性差異。
　　2.實(shí)驗(yàn)第二部分，超聲占空比和其它參數(shù)設(shè)置恒定時(shí)，超聲輸出聲壓越大則溶栓率越高。當(dāng)超聲輸出聲壓為5.47MPa時(shí)，微泡聯(lián)合治療超聲的溶栓率最高，與其它各組比較均有顯著性差異。
　　二、病理學(xué)檢查：
　　

7、各組血栓標(biāo)本HE染色后在光鏡下觀察，治療前血栓紅細(xì)胞分布均勻、致密，未見明顯空隙，是以紅細(xì)胞為主的紅色血栓；單純微泡治療后，血凝塊紅細(xì)胞分布仍較均勻致密，只在表面形成小的散在空隙；單純超聲治療后，由于紅細(xì)胞的破壞，紅細(xì)胞間可見缺損，而且隨著聲壓和占空比的增大，缺損也越明顯。體外治療性超聲聯(lián)合微泡治療后，血栓結(jié)構(gòu)明顯疏松，并在血栓的周邊疏松細(xì)胞層及內(nèi)部均出現(xiàn)了大小不等的、不規(guī)則的缺損，并可見纖維網(wǎng)架不同程度地被破壞，隨著聲壓和占空比的增大