COPD急性發(fā)作期及緩解期患者血清IL-4、IL-8、IFN-γ的濃度變化及臨床意義.pdf

1、慢性阻塞性肺疾病(COPD)是呼吸系統(tǒng)常見病，是一種具有不完全可逆性氣流受限、呈進(jìn)行性發(fā)展與肺對有害顆粒和氣體的炎癥反應(yīng)有關(guān)的慢性炎癥性疾病，由于氣流受限是不完全可逆的，最終多發(fā)展為肺心病。COPD在全球患病率及死亡率呈明顯上升趨勢，嚴(yán)重影響患者的勞動能力和生活質(zhì)量，目前是世界疾病經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)的第五位及死亡原因的第四位，據(jù)世界衛(wèi)生組織預(yù)測，到2020年將成為死亡原因的第三位。2006年GOLD指出COPD是可預(yù)防、可治療伴有顯著肺外效應(yīng)的疾

2、病。 COPD確切發(fā)病機(jī)制不清楚，涉及細(xì)胞分子生物學(xué)機(jī)制、蛋白酶一抗蛋白酶系統(tǒng)、氧化應(yīng)激的作用等。COPD氣道炎癥是通過各種細(xì)胞產(chǎn)生的多種細(xì)胞因子及炎癥介質(zhì)介導(dǎo)且相互作用的一種慢性炎癥。白介素-8(IL-8)是研究最早的細(xì)胞因子，在COPD發(fā)病機(jī)制中起著重要作用。IL-8是中性粒細(xì)胞(PMN)的重要趨化因子，可誘導(dǎo)其形態(tài)變化，使細(xì)胞內(nèi)Ca<'2+>一過性升高，促進(jìn)脫顆粒、溶酶體酶釋放、生物活性物質(zhì)形成和呼吸爆發(fā)，形成超氧化物，從

3、而促進(jìn)炎癥反應(yīng)。輔助性T淋巴細(xì)胞1(TH1)主要分泌白介素．2(IL-2)、γ-干擾素(IFN-γ)，它主要介導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答，在抗感染、器官移植、排斥反應(yīng)和自身免疫疾病的誘導(dǎo)過程中起重要作用，輔助性T淋巴細(xì)胞2(TH2)主要分泌白介素-4(IL-4)，主要介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答，輔助抗體產(chǎn)生，在過敏反應(yīng)中起主導(dǎo)作用，促進(jìn)活化的B細(xì)胞分泌IgG和IgE抗體。TH1和TH2細(xì)胞所誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)能互相調(diào)節(jié)或產(chǎn)生交叉調(diào)節(jié)作用，IFN-γ可抑制TH2細(xì)

4、胞增殖，而IL-4可下調(diào)IFN-γ應(yīng)答反應(yīng)。 為探索COPD的發(fā)病機(jī)制，在此實驗中，我們檢測了COPD急性發(fā)作期和緩解期患者外周血中IL-8、γ-干擾素和白介素-4的血清濃度值，試圖探索COPD患者急性發(fā)作期和緩解期的免疫學(xué)機(jī)制，為COPD急性發(fā)作期的合理治療提供理論依據(jù)。 對象與方法 一、對象 COPD組選擇由2005年8月至2006年3月在我院住院的COPD急性發(fā)作期患者32例和對照組20例健康體檢者

5、。 二、儀器、試劑 (一)芬蘭Labsysbens Mk3型酶標(biāo)儀。 (二)IL-8采用上海卓康生物科技有限公司試劑盒。 (三)IFN-γ，IL-4北京晶美生物技術(shù)公司試劑盒，操作按試劑盒說明書進(jìn)行。 (四)日本產(chǎn)REPI-SPIROLAB肺功能儀。 三、方法 (一)標(biāo)本采集 入院后空腹抽取靜脈血6毫升，注入試管中，離心,2500rpm，15℃～20℃，10～20min，吸取血清

6、放入ependoff管中，-70℃低溫保存以備統(tǒng)一檢測。COPD緩解期再予空腹抽取靜脈血6毫升，立即同上述方法離心血清，放于-70℃冰箱保存，以待檢測IL-8，IFN-γ，IL-4。 (二)實驗方法 采用雙抗體夾心免疫吸附法(ELISA) 結(jié) 果 1．IL-8(pg/ml)：COPD急性期(245.19±82.23)，緩解期(103.66±33.12)較對照組(32.95±10.02)顯著增高，且COPD急性

7、期和緩解期的IL-8相比差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01)。 2．IL-4(pg/ml)：COPD急性發(fā)作期(80.95±13.67)比緩解期(25.56±8.6)和對照組(51.46±10.20)顯著升高(P<0.01)。 3．IFN-γ(pg/ml)：COPD急性發(fā)作期(22.36±4.46)較緩解期(16.76±4.04)、對照組(17.62±4.78)高，但無統(tǒng)計學(xué)意義。 4．COPD急性發(fā)作期IL-8(

8、245.19±82.23)與FEV1(1263±461)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.76，P<0.01) 討 論 COPD的主要病理基礎(chǔ)是氣道的慢性非特異性炎癥，主要特點是管腔內(nèi)以中性粒細(xì)胞聚集為主，管壁以T淋巴細(xì)胞浸潤為主，IL-8作為一種中性粒細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的趨化因子，在炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。在肺部，其主要來源于肺泡巨噬細(xì)胞，氣道上皮細(xì)胞，淋巴細(xì)胞和聚集的中性粒細(xì)胞，IL-8可耐受血清和滲出液中肽酶的降解，存在時

9、間長，因而能在局部累積，在反應(yīng)中發(fā)揮持續(xù)效應(yīng)，放大了炎癥反應(yīng)。本研究顯示，COPD急性發(fā)作期血清IL-8水平高于對照組，這表明在COPD急性發(fā)作期存在IL-8的過量產(chǎn)生，過量表達(dá)。COPD急性發(fā)作期患者血清IL-8水平高于治療后(p<0.01)，經(jīng)抗炎治療后，氣道炎癥得到控制，血清IL-8水平較治療前明顯降低，提示IL-8直接參與COPD的氣道炎癥反應(yīng)過程，而本結(jié)果表明治療后血清IL-8水平較正常對照組高且有顯著差異，這可能與COPD緩

10、解期仍有25％的細(xì)菌感染率有關(guān)。治療前FEV1下降，緩解期FEV1升高，與IL-8呈負(fù)相關(guān)，說明IL-8與氣流受限有關(guān)。 Th2細(xì)胞刺激體液免疫，分泌的IL-4能促進(jìn)B細(xì)胞的增殖和誘導(dǎo)抗體的產(chǎn)生，尤其是IgE的產(chǎn)生，TH1細(xì)胞主要分泌IFN-γ，IL-2和腫瘤死因子-α(TNF-α)，TH1有利于促進(jìn)機(jī)體清除感染源，包括隱藏在細(xì)胞內(nèi)的感染源，本組觀察到IL-4水平治療前明顯高于對照組，IFN-v水平治療前有高于對照組的趨勢，使I

11、FN-γ/IL-4比值較對照組減低，機(jī)體表現(xiàn)為TH2優(yōu)勢狀態(tài)趨勢，緩解期時IFN-γ水平低于對照組，IL-4水平明顯低于對照組，IFN-γ/IL-4比值治療后較對照組高，所以機(jī)體表現(xiàn)為TH1優(yōu)勢狀態(tài)。治療前表現(xiàn)為TH2優(yōu)勢狀態(tài)，治療后表現(xiàn)為TH1優(yōu)勢狀態(tài)，說明COPD急性發(fā)作期治療前后的TH1/TH2優(yōu)勢狀態(tài)存在明顯差異，這與IL-4， IFN-γ水平變化直接相關(guān)。 結(jié) 論 1．COPD急性發(fā)作期、緩解期IL-8明顯