骨形態(tài)發(fā)生蛋白復(fù)合多孔鈦鈮合金試件的實驗研究.pdf

1、目的:本課題利用新型多孔鈦鈮合金試件為骨組織再生工程構(gòu)架，觀察復(fù)合骨形態(tài)發(fā)生蛋白（Bone Morphogenetic Protein，BMP）的多孔鈦鈮合金試件在體外體內(nèi)表現(xiàn)出來的特性。進一步為研制新型多孔人工關(guān)節(jié)假體或其他骨組織再生骨植入物提供基礎(chǔ)實驗依據(jù)。
　　 方法:自行研制出70％孔隙度的鈦鈮合金試件，根據(jù)鈦鈮合金試件是否復(fù)合骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP)進行實驗分組: A:單純多孔鈦鈮合金實驗試件;B:復(fù)合BMP的多孔鈦鈮

2、合金實驗試件。體外實驗部分:將BMSCS懸液與多孔鈦鈮合金試件按實驗分組復(fù)合，觀察BMSCS于合金試件細(xì)胞支架貼附后移入相應(yīng)培養(yǎng)基培養(yǎng)。于不同時間觀察點取材，通過倒置相差顯微鏡、掃描電鏡、成骨細(xì)胞表型檢測等方法對合金支架表面及孔洞內(nèi)BMSC生長以及成骨分化進行觀察鑒定。體內(nèi)試驗部分:將A、B組實驗試件植入兔大腿肌肉內(nèi)，分別取10天、20天、30天實驗試件周圍0.5cm范圍內(nèi)組織，通過組織切片HE染色它們在體內(nèi)的組織相容性、周圍組織生長分

3、化情況及組織-金屬界面結(jié)合情況。
　　 使用SPSS17.0軟件包進行統(tǒng)計分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間同一時間各指標(biāo)比較采用組間方差分析。
　　 結(jié)果:體外實驗發(fā)現(xiàn):倒置相差顯微鏡、掃描電鏡等方法顯示兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在未復(fù)合BMP的合金試件表面及試件孔洞內(nèi)黏附增殖正常，表現(xiàn)出良好的細(xì)胞相容性，其成骨細(xì)胞表型檢測呈陰性。而兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在復(fù)合BMP的合金試件內(nèi)表現(xiàn)出向成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)化，其成骨細(xì)胞表型檢測呈陽性。

4、
　　 體內(nèi)試驗發(fā)現(xiàn):實驗試件周圍軟組織切片HE染色檢測顯示:10、20、30天肌肉內(nèi)合金試件周圍0.5cm范圍組織有輕微的炎癥反應(yīng)和異物反應(yīng)。其中復(fù)合BMP組的周圍組織在10天時鏡下可見有新生血管形成;20天時鏡下可見有多個新生血管形成，局部可見肥大、深染的纖維細(xì)胞;30天時鏡下可見組織內(nèi)有鈣組織生成。
　　 結(jié)論:
　　 1、體外兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在單純多孔鈦鈮合金材料表面粘附及增殖良好，細(xì)胞能沿孔壁向多孔合

5、金試件內(nèi)部生長，但是未表現(xiàn)出成骨特性。
　　 2、體外兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在復(fù)合BMP的多孔鈦鈮合金試件中可經(jīng)誘導(dǎo)向成骨細(xì)胞分化，并可在多孔金屬試件內(nèi)的空間結(jié)構(gòu)中形成鈣組織。
　　 3、多孔鈦鈮合金試件在兔肌肉中中表現(xiàn)出輕微的炎癥反應(yīng)和異物反應(yīng)，其材料本身對于周圍組織有誘導(dǎo)血管生成的效果，但是作用效果緩慢。
　　 4、復(fù)合BMP的多孔鈦鈮合金植入兔肌肉內(nèi)可以促進其周圍組織中早期的血管長入、成纖維組織形成及纖維組織的