臍帶血中CD71+紅細(xì)胞的含量與新生兒感染發(fā)生的關(guān)系的前瞻性研究.pdf

1、背景及目的：
　　新生兒容易發(fā)生感染，目前全球新生兒感染的發(fā)病率約7/1000例活產(chǎn)嬰兒。同時，新生兒感染的死亡率高,感染仍是造成新生兒死亡的三大原因之一,約32％的新生兒死亡與感染有關(guān)。但是，新生兒感染的臨床表現(xiàn)具有不典型性、多樣性、隱匿性的特點，目前尚缺乏新生兒快速、特異、有效的早期診斷指標(biāo)，因此對新生兒感染易感性的預(yù)測指標(biāo)的研究具有重要的意義。傳統(tǒng)理論認(rèn)為新生兒對感染的易感性，是由于新生兒尤其是早產(chǎn)兒機(jī)體發(fā)育不成熟，特異性與

2、非特異性免疫功能低下，容易受到病毒、細(xì)菌、真菌等侵犯引起新生兒感染性疾病。然而，這種免疫功能低下的個體差異大，且有賴于激發(fā)環(huán)境。這種相互矛盾的觀點呼喚一個更有特異性的解釋來說明新生兒免疫力低下的原因。目前，有研究發(fā)現(xiàn)新生小鼠和人臍帶血生理性CD71+紅細(xì)胞增加有免疫抑制效應(yīng)；成人細(xì)胞在輸入新生小鼠體內(nèi)，或者與新生兒脾細(xì)胞共培養(yǎng)后，其固有免疫保護(hù)因子的分泌減少。CD71即轉(zhuǎn)鐵蛋白受體，是一種胎兒紅細(xì)胞膜抗原，存在于早期紅細(xì)胞、單核細(xì)胞和激

3、活的淋巴細(xì)胞上，但不存在于成熟的紅細(xì)胞上。在原始有核紅細(xì)胞，CD71表達(dá)很弱或者檢測不到，而在終末有核紅細(xì)胞上陽性檢出率可達(dá)100%。在新生小鼠除去CD71+細(xì)胞，或者隨著新生兒生后生長發(fā)育而減少的CD71+細(xì)胞數(shù)目，均與其免疫抑制效應(yīng)的丟失和在圍生期抵抗李斯特菌和大腸桿菌的能力的保存呈平行關(guān)系。根據(jù)國內(nèi)外研究現(xiàn)狀，本項目組對新生兒感染與CD71+紅細(xì)胞的關(guān)系提出假設(shè)：新生兒感染的易感性與臍帶血中CD71+紅細(xì)胞的含量相關(guān)。為了論證該假

4、設(shè)，本實驗應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測孕婦分娩時臍帶血中CD71+紅細(xì)胞的含量，并跟蹤隨訪分娩新生兒1個月，收集相關(guān)臨床資料，分析臍帶血中CD71+紅細(xì)胞含量與新生兒感染發(fā)生的關(guān)系，從而明確臍帶血中CD71+紅細(xì)胞含量對新生兒感染的預(yù)測作用及其臨床意義。
　　方法：
　　1）標(biāo)本來源：2014年7月1日至2014年12月31日在汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院分娩的孕婦的臍帶血標(biāo)本。
　　2）入組標(biāo)準(zhǔn)：分娩孕婦年齡大于18歲；孕婦分

5、娩前無感染病史；孕婦分娩前未使用抗生素；無腫瘤、高血壓、心臟病、糖尿病等嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病。
　　3）臨床資料的收集：收集分娩孕婦及新生兒的相關(guān)臨床資料，收集內(nèi)容見附件表格。
　　4）病例隨訪：所有入組病例隨訪新生兒1個月，每1周電話隨訪1次，記錄新生兒發(fā)生感染的情況及預(yù)后。
　　5）標(biāo)本的前期處理：收集本院分娩的孕母臍帶血6ml，分別留置在帶有抗凝劑的真空管中；采用1700轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘，分離出血漿，保存于-70℃；

6、分離血漿后，將用Ficoll-Hypaque梯度液加入剩余的血液中，3500轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘，分離出紅細(xì)胞和白細(xì)胞，取紅細(xì)胞液（每6ml臍帶血中約能分離出2ml紅細(xì)胞液），采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測CD71+紅細(xì)胞含量。
　　6）項目研究人員的分工和研究過程中的盲法
　　7）采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行臨床資料及實驗結(jié)果的統(tǒng)計分析；CD71+紅細(xì)胞含量、孕母及新生兒的臨床資料和新生兒在1個月內(nèi)發(fā)生感染的情況等資料采用非參數(shù)檢

7、驗；采用Logistic回歸模型對影響新生兒在1個月內(nèi)發(fā)生感染的情況的因素進(jìn)行多因素綜合分析；設(shè)定P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1、根據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)及排除標(biāo)準(zhǔn)有87例新生兒進(jìn)入分析,其中發(fā)生感染18例(新生兒敗血癥9例，新生兒肺炎7例,結(jié)膜炎1例,膿皰疹1例),未發(fā)生感染69例。所有新生兒中男性48名,女性39名；早產(chǎn)兒42名,足月兒45名；住新生兒科28例，未住新生兒科59例；使用抗生素18例，未使用抗生素

8、69例。
　　2、發(fā)生感染與未發(fā)生感染的新生兒的CD71+紅細(xì)胞比率和CRP的差異有統(tǒng)計學(xué)意義；WBC差異無統(tǒng)計學(xué)(t=0.62，P=0.641)。
　　3、CD71+紅細(xì)胞比率按小于5.0%,大于5.0%分為陰性與陽性，CRP按小于8mg/L，大于8mg/L分為陰性與陽性。在全部研究對象和發(fā)生感染的新生兒中，CD71+紅細(xì)胞比率診斷感染的陽性率較CRP高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；CRP與CD71+紅細(xì)胞比率診斷感

9、染的特異度和靈敏度的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，CD71+紅細(xì)胞比率的特異度和靈敏度均高于CRP，而兩者的陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　5、CD71+紅細(xì)胞比率陽性(大于5.0%)與抗生素使用存在關(guān)聯(lián)性,關(guān)聯(lián)性大小為r=0.82,P=0.000,有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　6、性別、出生體重對CD71+紅細(xì)胞比率無影響,無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；出生胎齡和胎膜早破對CD71+紅細(xì)胞比率有

10、影響,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　7、logistic回歸分析顯示出生胎齡和母體胎膜早破對新生兒出生時臍帶血中CD71+紅細(xì)胞比率均有影響?；貧w方程的方差分析X2=64.931,P=0.000，差異有統(tǒng)計學(xué)意義,決定系數(shù)R2=0.343，復(fù)相關(guān)系數(shù)R=0.59,回歸方程擬合度為43.7%。
　　結(jié)論：
　　1）新生兒出生時，臍帶血中CD71+紅細(xì)胞的含量與新生兒感染的發(fā)生率呈正相關(guān)，可作為新生兒感染的早期預(yù)測指