夏天無(wú)對(duì)腦梗死大鼠NOS、iNOS和NSCs、SYN表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)旨在通過(guò)建立大鼠局灶性腦梗死模型，檢測(cè)大鼠血清中一氧化氮合酶(NOS)，誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)的表達(dá)，常規(guī)HE染色觀察大鼠海馬區(qū)的形態(tài)學(xué)改變，免疫組織化學(xué)法檢測(cè)神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)和突觸素(SYN)陽(yáng)性表達(dá)，評(píng)價(jià)夏天無(wú)對(duì)腦梗死大鼠模型的改善情況，探討夏天無(wú)對(duì)大鼠腦梗死后腦可塑性的影響，以期為臨床提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：(1)造模：參照文獻(xiàn)采用栓線法制作大鼠永久性大腦中動(dòng)脈閉塞模型。(2)分組：造模成功的

2、大鼠采用隨機(jī)數(shù)字表法分為4組，分別為模型組，夏天無(wú)低劑量組，夏天無(wú)高劑量組，維腦路通組，另設(shè)空白組及假手術(shù)組。(3)給藥：夏天無(wú)低劑量組給予夏天無(wú)2.4g.kg-1.d-1灌胃，夏天無(wú)高劑量組給予夏天無(wú)9.6g.kg-1.d-1灌胃，維腦路通組予維腦路通144mg.kg-1.d-1灌胃。模型組、空白組及假手術(shù)組予生理鹽水6ml.kg-1.d-1灌胃，連續(xù)7天。(4)5—溴脫氧尿嘧啶(BrdU)標(biāo)記：各組大鼠造模成功12H后1～7d給予腹

3、腔注射BrdU生理鹽水(10mg/ml)，30mg.kg-1.d-1，每日2次，間隔8H。(5)指標(biāo)測(cè)定：紫外分光光度儀測(cè)大鼠血清中NOS、iNOS的吸光度，計(jì)算血清NOS、iNOS活力；常規(guī)HE染色觀察大鼠海馬區(qū)的形態(tài)學(xué)改變，免疫組織化學(xué)法檢測(cè)BrdU標(biāo)記的NSCs和SYN陽(yáng)性表達(dá)。
　　 結(jié)果：(1)HE檢測(cè)病理變化：空白組、假手術(shù)組未發(fā)現(xiàn)明顯病理變化;模型組可見(jiàn)結(jié)構(gòu)松散，神經(jīng)細(xì)胞變形，胞核固縮；各治療組大部分神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)及

4、結(jié)構(gòu)接近正常，偶見(jiàn)細(xì)胞胞體變小，胞核固縮。(2)NOS、iNOS檢測(cè)：與空白組、假手術(shù)組相比，模型組NOS、iNOS活性均明顯增強(qiáng)(P＜0.05)，各組治療組與模型組相比，NOS、iNOS活性均降低，有差異顯著性(P＜0.05)，治療組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。(4)腦可塑性相關(guān)檢測(cè)：NSCs和SYN?？瞻捉M和假手術(shù)組NSCs、SYN有少量表達(dá);與空白組及假手術(shù)組比較，模型組NSCs、SYN表達(dá)變化顯著(P＜0.05)；各

5、治療組較模型組NSCs、SYN表達(dá)顯著增強(qiáng)(P＜0.05)；各治療組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：(1)采用栓線法制作大鼠局灶性腦梗死模型，有較好的可操作性和穩(wěn)定性，是理想的造模方法之一。(2)夏天無(wú)可改善腦梗死模型大鼠腦組織的病理變化，提示夏天無(wú)可能具有防治腦梗死的作用。(3)夏天無(wú)可抑腦梗死大鼠NOS、iNOS的活性，提示夏天無(wú)可干擾損傷級(jí)聯(lián)反應(yīng)，并間接減少NO神經(jīng)毒性，抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡或死亡，為神經(jīng)修復(fù)