夏天無對腦梗死大鼠NOS、iNOS和NSCs、SYN表達影響的實驗研究.pdf

1、目的：本實驗旨在通過建立大鼠局灶性腦梗死模型，檢測大鼠血清中一氧化氮合酶(NOS)，誘導型一氧化氮合酶(iNOS)的表達，常規(guī)HE染色觀察大鼠海馬區(qū)的形態(tài)學改變，免疫組織化學法檢測神經(jīng)干細胞(NSCs)和突觸素(SYN)陽性表達，評價夏天無對腦梗死大鼠模型的改善情況，探討夏天無對大鼠腦梗死后腦可塑性的影響，以期為臨床提供實驗依據(jù)。
　　 方法：(1)造模：參照文獻采用栓線法制作大鼠永久性大腦中動脈閉塞模型。(2)分組：造模成功的

2、大鼠采用隨機數(shù)字表法分為4組，分別為模型組，夏天無低劑量組，夏天無高劑量組，維腦路通組，另設空白組及假手術(shù)組。(3)給藥：夏天無低劑量組給予夏天無2.4g.kg-1.d-1灌胃，夏天無高劑量組給予夏天無9.6g.kg-1.d-1灌胃，維腦路通組予維腦路通144mg.kg-1.d-1灌胃。模型組、空白組及假手術(shù)組予生理鹽水6ml.kg-1.d-1灌胃，連續(xù)7天。(4)5—溴脫氧尿嘧啶(BrdU)標記：各組大鼠造模成功12H后1～7d給予腹

3、腔注射BrdU生理鹽水(10mg/ml)，30mg.kg-1.d-1，每日2次，間隔8H。(5)指標測定：紫外分光光度儀測大鼠血清中NOS、iNOS的吸光度，計算血清NOS、iNOS活力；常規(guī)HE染色觀察大鼠海馬區(qū)的形態(tài)學改變，免疫組織化學法檢測BrdU標記的NSCs和SYN陽性表達。
　　 結(jié)果：(1)HE檢測病理變化：空白組、假手術(shù)組未發(fā)現(xiàn)明顯病理變化;模型組可見結(jié)構(gòu)松散，神經(jīng)細胞變形，胞核固縮；各治療組大部分神經(jīng)細胞形態(tài)及

4、結(jié)構(gòu)接近正常，偶見細胞胞體變小，胞核固縮。(2)NOS、iNOS檢測：與空白組、假手術(shù)組相比，模型組NOS、iNOS活性均明顯增強(P＜0.05)，各組治療組與模型組相比，NOS、iNOS活性均降低，有差異顯著性(P＜0.05)，治療組間比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。(4)腦可塑性相關(guān)檢測：NSCs和SYN。空白組和假手術(shù)組NSCs、SYN有少量表達;與空白組及假手術(shù)組比較，模型組NSCs、SYN表達變化顯著(P＜0.05)；各

5、治療組較模型組NSCs、SYN表達顯著增強(P＜0.05)；各治療組間差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：(1)采用栓線法制作大鼠局灶性腦梗死模型，有較好的可操作性和穩(wěn)定性，是理想的造模方法之一。(2)夏天無可改善腦梗死模型大鼠腦組織的病理變化，提示夏天無可能具有防治腦梗死的作用。(3)夏天無可抑腦梗死大鼠NOS、iNOS的活性，提示夏天無可干擾損傷級聯(lián)反應，并間接減少NO神經(jīng)毒性，抑制神經(jīng)細胞凋亡或死亡，為神經(jīng)修復