喉癌裸鼠動(dòng)物模型中播散腫瘤細(xì)胞的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：建立喉癌裸鼠腫瘤模型，進(jìn)行外周血播散腫瘤細(xì)胞（disseminated tumor cell，DTC）和腫瘤組織突變型p53基因的檢測，判斷兩者之間的相關(guān)性及早期預(yù)示腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和預(yù)后的價(jià)值；對DTC陽性組給予小劑量的紫杉醇治療，判斷其殺滅DTC、延長生存期、減少腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的療效。 方法：70只裸鼠，隨機(jī)選擇10為對照組，其余為實(shí)驗(yàn)組建立裸鼠喉癌腫瘤模型，采用套式PCR法，以CK19mRNA為標(biāo)記物于腫瘤種植成功后第10

2、周檢測腫瘤組及對照組裸鼠外周血中的DTC；以RT-PCR和免疫組化法檢測腫瘤組織中突變型p53蛋白表達(dá)情況，觀察DTC與生存期及遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移的關(guān)系。DTC陽性組給予小劑量的紫杉醇治療，判斷其殺滅DTC、延長生存期、減少腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的療效。待裸鼠死亡后解剖肝、肺及淋巴結(jié)，采用連續(xù)病理切片HE染色證實(shí)是否發(fā)生轉(zhuǎn)移。 結(jié)果：腫瘤組DTC陽性率為66.67％（40/60），對照組為陰性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。腫瘤組織中突變型

3、p53陽性率為60.0％（36/60）；DTC陽性組中，P53也為陽性者為75.0％（30/40），而DTC陰性組中，P53蛋白陽性者為30.0％（6/20），喉癌腫瘤模型中p53與DTC的表達(dá)之間存在關(guān)聯(lián)X2=14.17，P<0.005，r=0.437，P<0.05，DTC和p53蛋白在喉癌腫瘤模型的表達(dá)呈正相關(guān)。DTC與突變型p53都為陽性組中位生存期為34周，陰性組為43周，（P<0.05），log-rank檢驗(yàn)=4.56，P=0

4、.0327，生存差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。DTC與突變型p53陽性組發(fā)生遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移率為42.9％（6/14），其中淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移4例，肝臟轉(zhuǎn)移1例，肺轉(zhuǎn)移1例：陰性組見2例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，轉(zhuǎn)移率14.3％（2/14），（P<0.05）差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。紫杉醇組DTC再次檢測為陰性，生理鹽水組仍為陽性。生理鹽水空白組1年帶瘤生存率23.1％（3/13），轉(zhuǎn)移率為53.8％（7/13）；小劑量紫杉醇治療組生存率為53.8％（7/13），轉(zhuǎn)移率為14.3％

5、（2/13）；DTC陰性組生存率為46.2％（6/13），未見轉(zhuǎn)移，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。Kaplan-Meier生存分析，生理鹽水空白對照組中位生存期為30周，和小劑量紫杉醇組經(jīng)log-rank檢驗(yàn)=6.171，p=0.013，小劑量紫杉醇能顯著提高動(dòng)物模型的生存時(shí)間（P<0.05）：生理鹽水空白組和DTC陰性組經(jīng)log-rank檢驗(yàn)=6.976，p=0.008，提示DTC陽性的動(dòng)物模型其生存時(shí)間較陰性組顯著降低（P<0.