IL-10對腦缺血大鼠內(nèi)源性干細(xì)胞增殖及分化的影響.pdf

1、【目的】IL-10在腦缺血后的神經(jīng)保護(hù)作用已普遍被國內(nèi)外學(xué)者接受。本研究采用建立大腦中動(dòng)脈閉塞(MCAO)模型后1小時(shí)對SD大鼠側(cè)腦室注射重組IL-10過表達(dá)慢病毒載體（促進(jìn)1L-10表達(dá)）和重組IL-10-RNAi慢病毒載體（抑制IL-10表達(dá)），觀察大鼠神經(jīng)損傷情況，檢測傷側(cè)腦組織中IL-10水平以及腦組織中Nestin、DCX表達(dá)情況，探討IL-10對腦缺血大鼠神經(jīng)再生機(jī)制。
　　【方法】
　　1、重組IL-10過表達(dá)

2、慢病毒載體以及重組IL-10-RNAi慢病毒載體的構(gòu)建和包裝。
　　2、采用線栓法建立大鼠MCAO腦缺血模型。重組IL-10過表達(dá)慢病毒載體（促進(jìn)1L-10表達(dá)）和重組IL-10-RNAi慢病毒載體（抑制IL-10表達(dá)）用PBS溶解后于造模后1小時(shí)經(jīng)側(cè)腦室注射進(jìn)行干預(yù)。采用ELISA檢測IL-10表達(dá)情況，判斷慢病毒轉(zhuǎn)染是否成功。
　　3、采用Longa5分制NDS法、修正的神經(jīng)行為學(xué)評分（mNSS）和改良貼紙去除試驗(yàn)評價(jià)各

3、組大鼠神經(jīng)功能變化。TTC染色并計(jì)算腦梗死體積判斷腦缺血后IL-10是否具有抑制凋亡作用。
　　4、造模7天后取腦，經(jīng)Western-Blot檢測Nestin、DCX表達(dá)情況。
　　【結(jié)果】
　　1、ELISA結(jié)果顯示，重組 IL-10過表達(dá)慢病毒載體干預(yù)后大鼠腦組織 IL-10表達(dá)增加，重組IL-10-RNAi慢病毒載體干預(yù)后則減少，提示兩者均成功轉(zhuǎn)染SD大鼠。
　　2、重組IL-10過表達(dá)慢病毒載體干預(yù)MCA