沉默Notch-1對膀胱癌EMT影響的體外研究.pdf

1、類號：密級：UDC：學(xué)號：416523212122南昌大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文沉默沉默Notch1對膀胱癌對膀胱癌EMT影響的影響的體外研究體外研究EffectofNotch1SilencingonEpithelialmesenchymalTransfmationwithBladderCancerinVitro劉仁升劉仁升培養(yǎng)單位（院、系）：南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院指導(dǎo)教師姓名、職稱：傅斌教授、主任醫(yī)師申請學(xué)位的學(xué)科門類：醫(yī)學(xué)學(xué)科專業(yè)名稱：外

2、科學(xué)（泌尿外科）論文答辯日期：2015年6月答辯委員會主席：評閱人：2015年4月摘要II摘要目的：目的：體外實(shí)驗(yàn)探討沉默Notch1受體對膀胱癌EMT的影響及分子機(jī)制。方法：方法：將Notch1shRNA及陰性對照組用Lip2000轉(zhuǎn)染膀胱癌5637細(xì)胞株，倒置顯微鏡下觀察5637細(xì)胞生長狀態(tài)以及形態(tài)的變化，并且觀察轉(zhuǎn)染效率；運(yùn)用qRTPCR及westernblot檢測轉(zhuǎn)染效率；qRTPCR及westernblot技術(shù)檢測Ecadhe

3、rin、Ncadherin、vimentin的mRNA及蛋白表達(dá)變化；流式細(xì)胞儀檢測凋亡率變化情況；transwell評估5637細(xì)胞侵襲能力的改變。結(jié)果：結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)的膀胱癌細(xì)胞數(shù)量明顯下降，細(xì)胞之間的連接減少，分布更分散，細(xì)胞皺縮、變小，熒光顯示轉(zhuǎn)染效率為80%；qRTPCR及westernblot檢測轉(zhuǎn)染效率結(jié)果顯示：轉(zhuǎn)染Notch1shRNA細(xì)胞，Notch1的mRNA和蛋白表達(dá)顯著性下調(diào)（P＜0.05）；qRTPCR及we

4、sternblot檢測EMT標(biāo)記物的結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染Notch1shRNA后，vimentin的mRNA及蛋白表達(dá)顯著下調(diào)（Ρ0.05），Ecadherin、Ncadherin的mRNA及蛋白表達(dá)顯著上調(diào)（Ρ0.05）；流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示:實(shí)驗(yàn)組的早、中晚期凋亡率均顯著上調(diào)，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；transwell表明轉(zhuǎn)染Notch1shRNA細(xì)胞的侵襲能力顯著下調(diào)（P＜0.05）。結(jié)論：結(jié)論：通過沉默Notch1受體部分