鮑曼不動(dòng)桿菌膿毒癥大鼠中性粒細(xì)胞的蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、目的:通過分離并鑒定鮑曼不動(dòng)桿菌膿毒癥大鼠中性粒細(xì)胞的差異表達(dá)蛋白質(zhì)，以發(fā)現(xiàn)可能在鮑曼不動(dòng)桿菌膿毒癥中起關(guān)鍵作用的蛋白和可用于早期診斷的鮑曼不動(dòng)桿菌膿毒癥標(biāo)志物。
　　方法：將24只成年雄性Wistar大鼠分為正常對(duì)照組、鮑曼不動(dòng)桿菌膿毒癥6小時(shí)組和鮑曼不動(dòng)桿菌膿毒癥12小時(shí)組，正常對(duì)照組腹腔注射生理鹽水，鮑曼不動(dòng)桿菌膿毒癥組腹腔注射鮑曼不動(dòng)桿菌（ATCC19606），并于6小時(shí)和12小時(shí)后取外周血分離中性粒細(xì)胞，提取中性粒細(xì)胞的

2、總蛋白后利用雙向凝膠電泳分離蛋白并進(jìn)行銀染，使用ImageMaster軟件進(jìn)行分析比較，選取在鮑曼不動(dòng)桿菌膿毒癥中明顯差異表達(dá)的蛋白點(diǎn)行質(zhì)譜分析，并選取蛋白加以免疫印跡驗(yàn)證。
　　結(jié)果：
　　1.獲得了分辨率和重復(fù)性均很好的雙向凝膠電泳蛋白圖譜，每組膠的蛋白表達(dá)點(diǎn)為2900個(gè)左右，平均匹配率分別為95％、90%、91%。
　　2.對(duì)篩選出的在鮑曼不動(dòng)桿菌膿毒癥中明顯差異表達(dá)的50個(gè)蛋白點(diǎn)，共有41個(gè)蛋白點(diǎn)被成功鑒定，分

3、別屬于抗氧化蛋白、信號(hào)傳導(dǎo)蛋白、細(xì)胞骨架及調(diào)控蛋白、能量代謝蛋白和蛋白酶類蛋白，其中在鮑曼不動(dòng)桿菌膿毒癥中高表達(dá)的24個(gè)，低表達(dá)的17個(gè)。
　　3.在41個(gè)蛋白中選取蛋白進(jìn)行免疫印跡驗(yàn)證，驗(yàn)證結(jié)果基本與雙向凝膠電泳及質(zhì)譜鑒定結(jié)果一致。
　　結(jié)論：
　　1.鮑曼不動(dòng)桿菌膿毒癥大鼠中性粒細(xì)胞總蛋白和正常大鼠中性粒細(xì)胞總蛋白相比差異顯著，且膿毒癥6小時(shí)組和12小時(shí)組的部分蛋白也有顯著差異。
　　2.本實(shí)驗(yàn)成功鑒定出41