釀酒酵母親株無損傷融合子的構(gòu)建和RAPD鑒定.pdf

1、原生質(zhì)體融合技術(shù)可把優(yōu)良菌株系譜中篩選獲得的不同“正突變株”作為親本，通過交換、重組，使優(yōu)良性狀集中于融合子，加快育種的速度，是一種極為重要的育種方法。但是為了便于檢出融合子，融合親株需要攜帶營養(yǎng)缺陷等篩選標(biāo)記，而損傷親株的遺傳背景，使融合子的優(yōu)良性狀有所弱化。本文嘗試使用RAPD標(biāo)記篩選融合子，以實(shí)現(xiàn)釀酒酵母親株無損傷融合子的構(gòu)建。 本文用80個(gè)隨機(jī)引物對欲作為構(gòu)建融合子的釀酒酵母(S.cerevisiae)親本菌株C18、C

2、19基因組DNA多態(tài)性進(jìn)行了RAPD分析。其中5個(gè)引物可在兩親本菌株間產(chǎn)生清晰且重復(fù)性好的特異性條帶，獲得了6條可以作為篩選標(biāo)記的特異性譜帶，其中3條屬于C18，3條屬于C19。經(jīng)原生質(zhì)體融合，構(gòu)建了遺傳背景無損傷的酒精發(fā)酵高轉(zhuǎn)化率的一系列融合子，經(jīng)過RAPD鑒定，其中的18株融合子其擴(kuò)增圖譜中不僅具有雙親共有的擴(kuò)增條帶，而且還具有雙親的特異性條帶，證明其確為C18和C19的雜種。該18株融合子酒精發(fā)酵能力經(jīng)與傳統(tǒng)的用營養(yǎng)缺陷型標(biāo)記篩選