人胰腺癌中DPC4-SMAD4-MADH4基因改變的檢測.pdf

1、該研究采用該科自建的5株人胰腺癌細胞系、11例新鮮冷凍和70例石蠟包埋人胰腺癌及癌旁正常胰腺組織配對資料,應(yīng)用1、PCR-SSCP銀染技術(shù)及PCR產(chǎn)物直接測序法檢測DPC4基因第1、2、3、4、8、11外顯子的缺失和突變情況;2、IHC技術(shù)檢測人胰腺癌中TβRII、TGFβ1、Smad4、P21<'wafl>、P16基因的蛋白表達情況;3、ISH技術(shù)檢測人胰腺癌中Smad4基因mRNA表達情況;4、Westernblot分析5株人胰腺癌

2、細胞系Smad4蛋白表達情況.以期從DNA、mRNA和蛋白水平了解DPC4/Smad4基因改變、產(chǎn)物表達情況及其與臨床病理的關(guān)系.并探討在TGF-β通路中TβRII、TGFβ1、Smad4、P21<'wafl>蛋白表達之間可能的相互關(guān)系,Smad4與P16基因蛋白表達的相關(guān)關(guān)系,探討該侯補腫瘤抑制基因在胰腺癌形成發(fā)展過程的可能作用機制.結(jié)果表明:人胰腺癌純合性缺失和突變是DPCR4/Smad4基因失活的主要機制,總改變率達40.28﹪.