GnT-V和CXCR4在胰腺癌轉(zhuǎn)移中的作用.pdf

1、研究背景：胰腺癌是一種治療效果差，死亡率高的疾病，外科手術(shù)切除仍是主要的治愈手段，但總的手術(shù)切除率低，根治性切除后的中位生存期只有17-20個月，在行手術(shù)的患者中約40％已達局部晚期，50％以上已有遠處轉(zhuǎn)移。僅少數(shù)患者屬早期，施行根治術(shù)后，5年生存率僅在15％-25％。故胰腺癌的治療面臨著嚴峻的問題。因此，有人稱胰腺痛為“癌中之王”，被國際醫(yī)學(xué)界列為“21世紀的頑固堡壘”。為研究胰腺癌的生物學(xué)特性，尋求新的輔助治療方法，近年來對胰腺癌的

2、分子生物學(xué)研究極為重視。細胞內(nèi)糖蛋白的糖鏈在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體中通過糖基轉(zhuǎn)移酶和糖營酶加工而形成。糖蛋白糖鏈最常見的變化是N-糖鏈分子量大小和分支數(shù)變化，這歸因于N-乙酸氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶v(GnT-V)的過表達。GnT-V是分布在高爾基體中的合成糖蛋白N-糖鏈分支結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵酶，催化形成N-糖鏈的GleNAcβ1，6分支結(jié)構(gòu)。近來大量報道，在乳腺癌、結(jié)腸癌、肝癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤等惡性腫瘤中大量表達由GnT-V及其產(chǎn)物β1，6分支分支結(jié)構(gòu)，并與腫

3、瘤細胞侵襲和遷移密切相關(guān)。己證實趨化因子(Chemokines)在為炎癥細胞提供遷移信號、并使之活化、進而啟動其定向移動并使之準確定位中扮演著至關(guān)重要的角色。近年來研究表明，許多腫瘤細胞可以限定性地表達某些趨化因子或趨化因子受體，并且存在著趨化因子信號途徑失調(diào)控，提示趨化因子及其受體可能通過與炎癥細胞浸潤相似的機制參與了腫瘤的發(fā)展、惡化和侵襲轉(zhuǎn)移。且有研究表明，趨化因子受體4(CXCR4)在結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移組織中表達顯著升高，并認為CXCR

4、4是器官靶向轉(zhuǎn)移關(guān)鍵因子。 目的：研究GnT-V和CXCR4在裸鼠胰腺癌模型(MIAPaCa-2細胞系)轉(zhuǎn)移中的作用；研究GnT-V在人胰腺癌標本中的表達及其與胰腺癌侵襲和轉(zhuǎn)移的關(guān)系。 方法：本研究利用胰腺癌細胞MIAPaCa-2建立了裸鼠原位胰腺癌模型，應(yīng)用PCR、cDNA芯片和免疫組化技術(shù)槍測出GnT-V和CXCR4在該細胞系及移植瘤中的表達情況，并進一步通過基因轉(zhuǎn)染技術(shù)、Transwell實驗和免疫組化技術(shù)研究了G

5、nT-V和ICXCR4胰腺癌模型和人胰腺癌轉(zhuǎn)移中的不同作用，為臨床治療胰腺癌，改善預(yù)后提供一定的理論依據(jù)。 結(jié)果：建成裸鼠原位胰腺癌模型；通過RT-PCR、cDNA基因芯片等方法證實：MiaPaCa-2細胞系中GnT-V基因表達陽性，而無CXCR4、GnT-III表達；利用基因轉(zhuǎn)染、Tranwell技術(shù)證實在胰腺癌轉(zhuǎn)移過程中，GnT-V的表達在決定腫瘤的轉(zhuǎn)移能力方面起到重要作用，而CXCR4的表達則決定著胰腺癌靶向肝轉(zhuǎn)移；運用免