RNA干擾沉默低氧誘導(dǎo)因子-1a對(duì)人腦膠質(zhì)瘤化療的影響及相關(guān)機(jī)制研究.pdf

1、四川大學(xué)博士學(xué)位論文RNA干擾沉默低氧誘導(dǎo)因子1a對(duì)人腦膠質(zhì)瘤化療的影響及相關(guān)機(jī)制研究姓名：李瑞春申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：外科學(xué)（神外）指導(dǎo)教師：游潮20070401四川大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)博士專業(yè)學(xué)位論文RNA干擾沉默低氧誘導(dǎo)因子一1a對(duì)人腦膠質(zhì)瘤化療的影響及相關(guān)機(jī)制研究研究生李瑞春導(dǎo)師游潮教授中文摘要目的：低氧誘導(dǎo)因子一l(hypoxiainduciblefactor1，HIF1)是一種廣泛存在于哺乳動(dòng)物和人體內(nèi)的轉(zhuǎn)錄因子，在低氧適應(yīng)和病理

2、反應(yīng)中發(fā)揮重要作用，與腫瘤的生長(zhǎng)和侵襲性密切相關(guān)。多藥耐藥相關(guān)蛋白(multidrugresistance—associatedprotein，MRP)是ATP結(jié)合盒膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白超家族成員，在人腦膠質(zhì)瘤中高表達(dá)，在膠質(zhì)瘤的多藥耐藥機(jī)制中起重要作用。本研究在體外實(shí)驗(yàn)中運(yùn)用RNA干擾技術(shù)，沉默低氧誘導(dǎo)因子一1a，觀察其對(duì)膠質(zhì)瘤MRP表達(dá)和化療的影響，為進(jìn)一步研究以HIF1為靶點(diǎn)聯(lián)合化療治療膠質(zhì)瘤提供實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。方法：①采用脂質(zhì)體法包裹化學(xué)

3、合成的HIF一1asiRNA片段轉(zhuǎn)染人膠質(zhì)瘤細(xì)胞系T98G細(xì)胞，并設(shè)立陰性對(duì)照和空白對(duì)照，在低氧(02，1％)培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h、48h、72h。運(yùn)用real—timePCR和Westernblot技術(shù)分別在mRNA和蛋白質(zhì)水平檢驗(yàn)siRNA轉(zhuǎn)染和干擾的有效性。②選取有效的siRNA片段轉(zhuǎn)染T98G細(xì)胞，設(shè)立陰性對(duì)照和空白對(duì)照，在低氧(02，1％)培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h、48h、72h，real—timePCR和Westernblot分別在