系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病的環(huán)境和遺傳因素研究.pdf

1、第一部分系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者EBV抗體表達(dá)研究
　　 目的:檢測(cè)系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者外周血抗EB病毒(EBV)-VCA IgG、IgA、IgM抗體的表達(dá),探討EB病毒感染與SLE及干擾素誘導(dǎo)基因表達(dá)水平的相關(guān)性。
　　 方法:收集55例SLE患者和29例正常人外周血標(biāo)本,用ELISA檢測(cè)血漿中抗EBV抗體,采用t檢驗(yàn)比較SLE與正常人抗EBV抗體的差異,分析SLE臨床表現(xiàn)及活動(dòng)度指標(biāo)(SLEDAI積分)與EBV抗體

2、水平的相關(guān)性。其中33例SLE患者和26例正常人外周血標(biāo)本分離有核細(xì)胞,提取RNA,以實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)MX1、OASL、OAS1、ISG15、LY6E的mRNA表達(dá)水平,采用Spearman相關(guān)分析法分析抗EBV抗體與干擾素(IFN)誘導(dǎo)基因表達(dá)水平的相關(guān)性。
　　 結(jié)果:(1)SLE患者外周血抗EBV抗體濃度顯著高于正常對(duì)照組[IgG(40.83±5.75)與(18.68±6.44)U／ml；IgA(15.45±1.83

3、)與(8.29±2.13)U／ml；IgM(7.82±1.04)與(3.70±1.15)U／ml](P值均<0.01)。(2)SLE患者抗EBV抗體與SLEDAI積分及臨床表現(xiàn)無(wú)相關(guān)性(P值均>0.05)。(3)SLE患者IFN誘導(dǎo)基因表達(dá)及IFN指數(shù)顯著高于正常對(duì)照組[IFN指數(shù)11.15±12.56與0±3.29](P值均<0.05)；但是與抗EBV抗體水平無(wú)相關(guān)性(P值均>0.05)。
　　 結(jié)論:抗EBV—VCA抗體在S

4、LE患者中高表達(dá),但與SLE疾病活動(dòng)度、臨床表現(xiàn)及干擾素誘導(dǎo)基因的高表達(dá)無(wú)相關(guān)性,提示SLE患者Ⅰ型IFN通路的紊亂可能受多種因素影響,EB病毒感染不能作為單一的或主要的影響因素；EB病毒感染可能參與了SLE發(fā)病,而非促進(jìn)病情活動(dòng)。
　　 第二部分狼瘡新基因OAZ在SLE患者骨髓間質(zhì)干細(xì)胞中作用機(jī)
　　 目的:通過(guò)沉默SLE患者骨髓間質(zhì)干細(xì)胞(MSC)中Olf-1／EBF相關(guān)鋅指蛋白(OAZ)基因,探討OAZ基因異常表達(dá)

5、對(duì)間質(zhì)干細(xì)胞功能的影響。
　　 方法:收集培養(yǎng)6例SLE患者骨髓間質(zhì)干細(xì)胞,運(yùn)用Accell技術(shù)沉默OAZ基因,以實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)OAZ、Id1-3及成脂、成骨基因LPL、PPAR Y、Osteocalcin、Runx2和CCL2的mRNA表達(dá)水平,采用配對(duì)樣本t檢驗(yàn)比較沉默前后上述基因mRNA表達(dá)的變化；收集共培養(yǎng)上清,用ELISA檢測(cè)CCL2、IDO、IL-17及IL-21的表達(dá)。
　　 結(jié)果:(1)OAZ基因

6、沉默組OAZ、Id1、Id2、Id3基因mRNA的表達(dá)水平顯著低于陰性對(duì)照組(P均<0.05)。(2)OAZ基因沉默組LPL、Osteocalcin、Runx2基因mRNA的表達(dá)水平顯著低于陰性對(duì)照組(P均<0.01)。(3)OAZ基因沉默組CCL2 mRNA的表達(dá)水平顯著高于陰性對(duì)照組；MSC培養(yǎng)上清中,OAZ基因沉默組CCL2的表達(dá)水平顯著高于陰性對(duì)照組(P均<0.05)。(4)MSC培養(yǎng)上清中未檢測(cè)出IL-17、IDO的表達(dá),IL