酶法合成β-丙氨酸工藝條件的研究.pdf

1、本論文研究了大腸桿菌的破壁條件、天門冬氨酸a-脫羧酶的提取條件及其細(xì)胞的酶學(xué)性質(zhì)，并將其純化。得到最佳破壁方法為研磨加1mg/mL溶菌酶，最佳提取介質(zhì)為pH8的0.05mol/L磷酸緩沖液。最適溫度37℃，最適pH為7。在100℃下放置1h酶活為0，pH3時(shí)放置1h酶活僅剩33U。最佳轉(zhuǎn)化時(shí)間24h。經(jīng)過鹽析、離子交換和凝膠層析后，酶得到了很好的純化，由于實(shí)驗(yàn)中酶活的損失，最終的酶活降到了純化前的3.66％。 對(duì)工程菌E.col

2、i BL21(DE3)/pET28 b(+)的固定化條件進(jìn)行研究，并研究了固定化細(xì)胞的性質(zhì)。得出最佳的固定化細(xì)胞交聯(lián)的條件為溫度30℃，pH5.5，時(shí)間6h。最適溫度37℃，最適pH7.5，在pH2和pH11的水溶液中浸泡30min仍然具有酶活。在100℃的高溫下放置1h后酶活趨近于0。連續(xù)轉(zhuǎn)化三次后仍有接近85％的酶活。 對(duì)酶法合成β-ala的工藝條件進(jìn)行了研究，得到的最佳發(fā)酵條件為接種量0.5％，發(fā)酵溫度37℃，培養(yǎng)時(shí)間28