名貴海洋中藥海龍的質(zhì)量控制技術(shù)及注射用丹紅粉針指紋圖譜相關(guān)性研究.pdf

1、名貴海洋中藥海龍，為脊索動物門硬骨魚綱、海龍目、海龍科魚類。中藥海龍為海龍科動物尖海龍、擬海龍、刁海龍的干燥體(《中國藥典》2005)。其性甘、溫，歸肝、腎經(jīng)，有溫腎壯陽、散結(jié)消腫的作用。主要用于陽痿遺精、癥瘕積聚、瘰疬痰核、跌打損傷等癥的治療。外治癰腫疔瘡。 作為傳統(tǒng)補(bǔ)益類中藥，海龍?jiān)谂R床上應(yīng)用廣泛，藥材市場售價(jià)達(dá)4000-8000元/kg，屬貴重藥材?！侗静菥V目拾遺》謂：“功倍海馬，催生尤捷效”。民間用藥(混淆品)還包括粗吻

2、海龍(Temminck et Schlegel)、棘海龍(海蝎魚)(Bleeker)、寶珈海龍(Bleeker)、貢氏柄頜海龍(Dunker)等。由于海龍藥材稀少，正品和代用品混用現(xiàn)象較為突出。關(guān)于海龍藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究報(bào)道較少，其質(zhì)量控制也僅限于外觀形態(tài)鑒別和經(jīng)驗(yàn)鑒別，未見其指紋圖譜及有效成分含量測定研究報(bào)道。 為了探索海洋中藥海龍的有效質(zhì)量控制方法，本課題選擇形態(tài)特征明顯的海龍基源生物刁海龍(Gray)為研究對象，進(jìn)行了系統(tǒng)化

3、學(xué)成分研究，得到了7個(gè)化合物，其中1個(gè)成分為首次自該藥材中分離得到。在此基礎(chǔ)上，進(jìn)行了刁海龍指紋圖譜和質(zhì)量控制方法研究，采用高效液相色譜(HPIC)法建立了藥材刁海龍的指紋圖譜，并建立了同時(shí)測定兩種指標(biāo)成分DHA和EPA的含量測定方法，對10批不同來源的刁海龍藥材的質(zhì)量進(jìn)行了比較分析。進(jìn)一步地，作為指紋圖譜技術(shù)的應(yīng)用，對臨床前研究中的新藥“注射用丹紅粉針”進(jìn)行了規(guī)范化指紋圖譜研究。研究結(jié)果將為名貴海洋中藥海龍的質(zhì)量控制和品質(zhì)評價(jià)提供科學(xué)

4、依據(jù)。 1．采用甲醇提取，柱色譜(CC)、制備高效液相色譜(PHPLC)等色譜分離方法，從藥材刁海龍中分離得到了7個(gè)化學(xué)成分。運(yùn)用光譜和波譜等結(jié)構(gòu)分析手名貴海洋中藥海龍的質(zhì)量控制技術(shù)及注射用丹紅粉針指紋圖譜相關(guān)性研究段，鑒定它們的結(jié)構(gòu)分別為：膽甾醇(M1)、膽甾-4-烯-3-酮(M2)、十六碳酸(M3)、十八碳酸(M4)、二十碳酸(MS)、二十碳五烯酸(EPA)(M6)、二十二碳六烯酸(DHA)(M7)其中，化合物M6為首次從該

5、藥材中得到。有文獻(xiàn)報(bào)道，DHA、EPA可能是海龍藥材溫腎壯陽作用的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。 2．通過色譜條件的優(yōu)化和系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)，以10批藥材為樣本，建立了藥材刁海龍的HPIC指紋圖譜。指紋圖譜中包含16個(gè)共有峰；通過與對照品對照，2個(gè)共有峰被指認(rèn)為DHA和EPA；非共有峰面積小于10％，符合指紋圖譜技術(shù)要求。 3．采用國家藥監(jiān)局推薦使用的“相似度判斷軟件”，對不同來源的刁海龍藥材進(jìn)行了相似度比較分析，結(jié)果表明，多數(shù)不同來源刁海

6、龍藥材的指紋圖譜相似度較高；采用建立的同時(shí)測定刁海龍藥材中DHA和EPA的HPLC含量測定方法，對不同來源的刁海龍藥材進(jìn)行了DHA和EPA含量測定，結(jié)果表明，不同來源刁海龍藥材的DHA和EPA含量差異較大，其中，主產(chǎn)地廣東藥材(S1、S3、S4、S7)的含量較高。 4．作為指紋圖譜技術(shù)的應(yīng)用，對臨床前研究中的新藥“注射用丹紅粉針”進(jìn)行了規(guī)范化指紋圖譜研究。采用HPLC方法，建立了相同條件下原藥材(丹參、紅花)、中間體和注射劑(粉