幾種基于納米標記的DNA傳感器的研究.pdf

1、核酸是生命遺傳物質，核酸堿基的突變將誘導多種疾病的產(chǎn)生。故對特定序列的DNA片段進行有效的識別和高靈敏度的檢測在基因表達分析、基因突變檢測和疾病診斷等眾方面都具有極其重要的意義。隨著生物納米技術的發(fā)展，納米材料為生物檢測技術的研究帶來了新的契機。例如，磁性納米粒子的磁分離技術已廣泛應用于對DNA、蛋白質以及細胞等的分離純化中。與有機熒光染料相比，量子點具有更優(yōu)越的光學特性，從而為解決有機熒光探針分子存在的問題提供了新方向。金納米材料因其

2、易制備、生物相容及獨特的光學性質等在DNA傳感器的應用中受到越來越多的關注。本論文綜合了諸多納米材料的優(yōu)越性，應用于新型DNA傳感器的研究，主要內(nèi)容包括：
　　(1)基于磁分離的DNA有機熒光放大檢測以納米金為載體標記兩種不同的DNA探針，利用bar-code DNA信號放大技術，同時結合磁性納米粒子的分離作用，通過液相雜交，將靶 DNA的熒光信號進行放大。該體系對靶DNA寡核苷酸的檢測限為1 pM,其靈敏度比常規(guī)的熒光檢測方法至

3、少提高一個數(shù)量級以上。去除背景，與完全正配(T0)和單堿基錯配(T1)靶序列三明治雜交后，二者的熒光信號強度之比為2.12:1,可顯著區(qū)分正錯配靶探針。
　　(2)基于磁分離和量子點熒光共振能量轉移的DNA檢測將磁分離技術與量子點熒光共振能量轉移相結合，構建了一種新型的DNA生物傳感器。制備了最外層包被綠色量子點的Fe3O4@SiO2@CdTe(Green)復合納米粒子，并以此復合粒子為載體修飾 DNA探針，與標記了橙色量子點的靶

4、 DNA進行雜交。結果表明成功制備了Fe3O4@SiO2@CdTe磁性/熒光復合粒子，粒子具有超順磁性，熒光信號明顯。雜交后，量子點間發(fā)生熒光能量轉移，與未發(fā)生熒光能量轉移的對照組相比，DNA的熒光檢測信號明顯加強，并可區(qū)分正錯配DNA序列。
　　(3)基于金納米棒的DNA檢測利用金納米棒高度靈敏的光學性質，本論文提出了一種基于金納米棒標記的DNA檢測體系。在金納米棒表面分別組裝兩種不同的巰基DNA探針，然后與靶DNA進行三明治雜