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文檔簡(jiǎn)介
1、近年來(lái),DNA檢測(cè)廣泛應(yīng)用于臨床診斷、基因表達(dá)、農(nóng)業(yè)、食品安全以及環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域,因此對(duì)DNA進(jìn)行快速、便捷、靈敏的檢測(cè)十分必要。傳統(tǒng)的DNA檢測(cè)方法有基于熒光的生物芯片技術(shù)、表面等離子共振(Surface Plasmon Resonance,SPR)等,但是這些檢測(cè)方法存在諸多不足,仍需改進(jìn)。近年來(lái),具有獨(dú)特物理化學(xué)性質(zhì)的新型材料—液晶已經(jīng)引起研究人員的廣泛關(guān)注。液晶是介于液態(tài)與固態(tài)之間的一種物質(zhì)形態(tài),具有雙折射性、彈性應(yīng)變等特性,基
2、底表面微小的變化即可引起液晶分子取向的變化,而液晶分子取向的變化可以轉(zhuǎn)變?yōu)楣鈱W(xué)信號(hào),肉眼即可觀察,因此在DNA檢測(cè)中備受關(guān)注。本文基于DNA雜交和液晶的雙折射性,構(gòu)建了固態(tài)-液晶傳感界面,并在其基礎(chǔ)上對(duì)DNA雜交進(jìn)行了檢測(cè);除此之外,本文還構(gòu)建了水-液晶界面,探究了不同表面活性劑對(duì)液晶分子排列的影響,并在其基礎(chǔ)上探索了單鏈DNA(ssDNA)對(duì)水-液晶界面的影響,為DNA雜交的檢測(cè)奠定了基礎(chǔ)。具體內(nèi)容如下:
(1)利用ssDN
3、A作為取向劑在固態(tài)-液晶界面構(gòu)建功能化基底。首先將三乙氧基硅基丁醛(TEA)修飾于固態(tài)基底表面,利用帶有醛基的TEA與修飾有氨基的ssDNA之間的反應(yīng),將ssDNA修飾在固態(tài)基底表面。探究了玻片在TEA中的修飾時(shí)間以及ssDNA在基底表面的表面覆蓋率對(duì)于功能化基底構(gòu)建的影響。
?。?)基于固態(tài)-液晶界面檢測(cè)DNA雜交的探索。采用上述方法構(gòu)建一種新型的利用ssDNA誘導(dǎo)液晶4-氰基-4’-戊基聯(lián)苯(5CB)垂直排列的功能化基底,通
4、過(guò)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,ssDNA會(huì)誘導(dǎo)5CB分子垂直排列,偏光顯微鏡下觀察到均一的黑色,當(dāng)加入互補(bǔ)ssDNA之后,會(huì)發(fā)生雜交反應(yīng),擾亂5CB分子的排列,偏光顯微鏡下觀察到彩色紋理,從而達(dá)到檢測(cè)DNA的效果。在優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件(玻片在TEA溶液中的修飾時(shí)間為1h,ssDNA的最佳濃度為20 nM)下,該檢測(cè)方法的檢測(cè)限為0.1 nM,并且具有良好的特異性和重復(fù)性。
?。?)在水-液晶界面不同表面活性劑對(duì)5CB分子取向的影響。根據(jù)表面活性劑與
5、5CB分子之間的相互作用,探討了在水-液晶界面不同表面活性劑(十八烷基三甲基溴化銨,十二烷基三甲基溴化銨,正辛基三甲基溴化銨,十二烷基硫酸鈉)對(duì)5CB分子取向的影響,探究了每種表面活性劑誘導(dǎo)5CB分子垂直排列的最佳濃度與響應(yīng)時(shí)間,鏈長(zhǎng)不同的同類表面活性劑對(duì)5CB分子取向的影響,以及鏈長(zhǎng)相同的不同類表面活性劑對(duì)5CB分子取向的影響。除此之外,我們還探究了在水-液晶界面ssDNA對(duì)5CB分子取向的影響,為后續(xù)DNA雜交的檢測(cè)提供了方法與條件
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