三種新型DNA電化學(xué)生物傳感器的研制及其在DNA檢測(cè)中的應(yīng)用.pdf

1、脫氧核糖核酸（簡(jiǎn)稱(chēng)為DNA）是生物遺傳信息的載體，研究它的序列組成對(duì)了解遺傳疾病的根源以及疾病的預(yù)防有著重要的意義。設(shè)計(jì)出快速、靈敏、選擇性高的DNA電化學(xué)生物傳感器一直是生化工作者致力研究的一個(gè)重要方向。本論文通過(guò)DNA的循環(huán)雜交反應(yīng)和對(duì)電極表面進(jìn)行修飾，研制了三種不同的DNA電化學(xué)生物傳感器，并對(duì)其檢測(cè)DNA的能力進(jìn)行了考察。
　　(1)利用Nb.BbvCl限制性?xún)?nèi)切酶和Klenow聚合酶的特性設(shè)計(jì)了一個(gè)DNA的聚合剪切循環(huán)反

2、應(yīng)，之后再利用環(huán)DNA的滾環(huán)放大效應(yīng)在金電極表面生成一條長(zhǎng)的ssDNA。然后以氯化六氨合亞釕為電信號(hào)指示劑，設(shè)計(jì)了一個(gè)靈敏的DNA電化學(xué)生物傳感器。通過(guò)循環(huán)伏安法(CV)和交流阻抗法(EIS)對(duì)電極進(jìn)行表征以確保DNA的連接及雜交循環(huán)反應(yīng)正常進(jìn)行。在優(yōu)化好的條件下考察了對(duì)目標(biāo)DNA的響應(yīng)范圍及工作曲線(xiàn)。其檢測(cè)線(xiàn)性范圍為1.0×10-9～1.5×10-8mol·L-1，檢測(cè)限為6.6×10-10mol·L-1(S/N=3)。
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3、2)將銀納米粒子沉積到碳納米管修飾的玻碳電極表面，同肘利用雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)進(jìn)行放大，以鄰菲羅啉鈷為指示劑，制備了一種新的靈敏度高的DNA電化學(xué)生物傳感器。通過(guò)循環(huán)伏安法(CV)和交流阻抗法(EIS)對(duì)電極進(jìn)行表征以確保DNA的連接及雜交循環(huán)反應(yīng)正常進(jìn)行。由于碳納米管和銀納米粒子的修飾，大大增強(qiáng)了玻碳電極的有效表面積及導(dǎo)電性能，提高了該電化學(xué)生物傳感器的靈敏度?？疾炝藢?duì)目標(biāo)DNA的響應(yīng)范圍及工作曲線(xiàn)。其檢測(cè)線(xiàn)性范圍為1.0×10-10～1.4

4、×10-9mol·L-1，檢測(cè)限為1.35×10-11mol·L-1(S/N=3)。
　　(3)合成了3種氨基酸水楊醛配體，7種氨基酸水楊醛金屬配合物并用紅外光譜對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征。篩選出微分脈沖伏安信號(hào)較好的苯丙氨酸水楊醛鈷配合物，考察了其與ssDNA的結(jié)合能力與作用機(jī)理。在優(yōu)化好的實(shí)驗(yàn)條件下制作了檢測(cè)ssDNA的工作曲線(xiàn)，測(cè)定了檢測(cè)限。對(duì)ssDNA的檢測(cè)線(xiàn)性范圍為1.0×10-9～1.30×10-8mol·L-1，檢測(cè)限為9.