PPARγ2基因Pro12Ala多態(tài)性與2型糖尿病及其血脂的關(guān)系.pdf

1、前言
　　 2型糖尿病(T2DM)是一種常見(jiàn)的多基因復(fù)雜性疾病,其發(fā)病的2個(gè)主旋律是胰島素分泌缺陷和胰島素抵抗。Deeb等首次報(bào)道了Pro12Ala基因多態(tài)性與T2DM的相關(guān)性,發(fā)現(xiàn)糖耐量正常人群中A等位基因突變率為9.3％,糖耐量降低者為4％,而T2DM人群中僅為2.2％。也有學(xué)者發(fā)現(xiàn),Pro12A1a多態(tài)性與T2DM發(fā)病危險(xiǎn)性增加有關(guān),A等位基因可能可以預(yù)示IGT向T2DM的發(fā)展。但是,Stefanski及印尼爪哇人群和中國(guó)

2、人群研究認(rèn)為,Pro12Ala多態(tài)性與T2DM沒(méi)有關(guān)聯(lián)。
　　 胰島素抵抗是T2DM患者的常見(jiàn)特征,它可以預(yù)測(cè)糖尿病的發(fā)病。T2DM患者骨骼肌胰島素抵抗的特征包括胰島素介導(dǎo)的葡萄糖攝取和利用不充分及脂肪氧化抑制效應(yīng)減弱,需要機(jī)體分泌較多的胰島素方能代償此種缺陷。在大量研究中,值得關(guān)注的是非糖尿病者攜帶A基因者有更強(qiáng)的胰島素敏感性。隨機(jī)選取非糖尿病人群檢測(cè)其胰島素分泌和敏感性,攜帶P等位基因和攜帶A等位基因的兩組人群中胰島素分泌的

3、各階段沒(méi)有明顯不同,但后組的胰島素敏感性明顯增加。所以推斷A等位基因減少糖尿病的發(fā)生與增加胰島素敏感性有關(guān)。
　　 脂質(zhì)代謝紊亂是動(dòng)脈粥樣硬化的重要危險(xiǎn)因素。近年來(lái)研究表明PPARγ在調(diào)節(jié)體內(nèi)脂質(zhì)代謝和能量平衡中具有重要作用。PPARγ激活可以促進(jìn)白色脂肪細(xì)胞分化,增加小脂肪細(xì)胞的數(shù)量而減少大脂肪細(xì)胞的數(shù)量。小脂肪細(xì)胞對(duì)胰島素的反應(yīng)性更強(qiáng),有利于促進(jìn)葡萄糖攝取。PPARγ在前脂肪細(xì)胞中的激活可以增加胰島素及胰島素樣生長(zhǎng)因子(IG

4、F-1)刺激的脂肪細(xì)胞分化過(guò)程,增加一些脂肪組織特異性的基因表達(dá)。脂肪細(xì)胞分裂期間PPARγ誘導(dǎo)多種與脂肪酸代謝相關(guān)的基因表達(dá),如脂酰輔酶A合成酶、脂蛋白脂酶(LPL)和脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白等。Pro12Ala突變使LPL活性降低影響TG清除,在肥胖個(gè)體中尤為突出?？赡苁且?yàn)榉逝终咧炯?xì)胞數(shù)目增多及體積增大,含有較多異構(gòu)體的脂肪組織,所以突變對(duì)血脂的影響僅在肥胖狀態(tài)下顯現(xiàn),表現(xiàn)為T(mén)G增高,高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-C)降低。對(duì)于非肥胖的健

5、康人群來(lái)講,多項(xiàng)研究認(rèn)為Pro12Ala與脂肪代謝異常有關(guān),Meirhaeghe等報(bào)道,攜帶A等位基因者血總膽固醇(TC)升高,LDL-C升高。有學(xué)者研究認(rèn)為A等位基因者血清總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、甘油三酯增高。上述結(jié)果可能與Pro12Ala突變下調(diào)PPARγ2的轉(zhuǎn)錄活性有關(guān)。Montagnana M等研究認(rèn)為攜帶A等位基因者甘油三酯降低。最近RadhaV及國(guó)內(nèi)研究認(rèn)為Pro12Ala多態(tài)性與血脂沒(méi)有相關(guān)性。并且有研究認(rèn)為,Pro

6、12Ala突變對(duì)血脂影響與性別也有關(guān)系。
　　 PPARγ2基因Pro12Ala多態(tài)性是目前研究的熱點(diǎn),其對(duì)2型糖尿病、胰島素抵抗、脂質(zhì)代謝、肥胖及其他許多疾病具有重要的作用。本研究通過(guò)在遼寧地區(qū)對(duì)漢族人正常人群和2型糖尿病人群的基因檢測(cè)來(lái)探討該基因在其中的表達(dá)及對(duì)2型糖尿病患者脂代謝水平的影響,為2型糖尿病的治療提供有力依據(jù)。
　　 方法
　　 一、實(shí)驗(yàn)對(duì)象及分組
　　 (一)實(shí)驗(yàn)分組
　　 1

7、、實(shí)驗(yàn)組331例,按WHO1999年2型糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn),隨機(jī)選取臨床診斷為2型糖尿病的住院患者(男178例,女153例)。其中排除標(biāo)準(zhǔn):用過(guò)調(diào)脂藥物；酗酒史和(或)嗜煙者；冠心病(CHD)、高血壓、腦血管病、腎臟疾病及外周血管病變；糖尿病及高血壓家族史；用過(guò)降糖藥物或使用過(guò)胰島素
　　 按下列條件分為亞組
　　 (1)將所有2型糖尿病患者分為PPARγ2基因Pro12Ala突變組和非突變組
　　 (2)按體重指數(shù)

8、肥胖組(BMI≥25kg/m2)和非肥胖組(BMI<25 kg/m2)分層后每層再分為PPARγ2基因Pro12Ala突變組和非突變組
　　 (3)按性分層后每層再分為PPARγ2基因Pro12Ala突變組和非突變組
　　 2、對(duì)照組254例(男133例,女121例)來(lái)自健康體檢者,排除:糖尿??；冠心?。桓哐獕?；腦血管??；糖尿病及高血壓家族史。
　　 二、各項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)
　　 1、采用多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)限制性片

9、段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)技術(shù)檢測(cè)不同組別PPARγ2基因Pro12Ala多態(tài)性
　　 2、應(yīng)用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、空腹血糖,放免法測(cè)定空腹胰島素水平
　　 3、身高、體重由專(zhuān)人測(cè)量并計(jì)算體重指數(shù)(BMI)=體質(zhì)量[kg/身高(m)2]；按HOMA模型計(jì)算胰島素抵抗指標(biāo)(HOMA-IR)=[FIN(mU/L)×FPG(mmol/L)/22.5]。
　　 三、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理<

10、br>　　 直接判讀樣本基因型并計(jì)算組內(nèi)基因型及等位基因型頻率,統(tǒng)計(jì)學(xué)處理使用SPSS17.0軟件完成,分析各組患者基因型頻率是否符合Hardy-Weinberg平衡來(lái)估測(cè)樣本的代表性。計(jì)數(shù)資料間的比較用X2檢驗(yàn),計(jì)量資料間的比較用t檢驗(yàn),組間計(jì)量資料均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((X)±S)表示,P<0.05為差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果
　　 1、PPARγ2基因Pro/Pro、Pro/Ala及Ala/Ala因型頻率分別為0

11、.949、0.051及0,等位基因Pro、Ala的頻率分別為0.974、0.026。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組中肥胖亞組和非肥胖亞組、驗(yàn)組中女性亞組和男性亞組間基因頻率機(jī)等位基因頻率分布均無(wú)明顯差異(p>0.05)。
　　 2、實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組臨床資料比較:實(shí)驗(yàn)組FPG、HOMA-IR高于對(duì)照組,HDL-C低于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。
　　 3、在對(duì)照組中PPARγ2基因Pro12Ala突變組的FPG低于非

12、突變組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。BMI、FPG、FINS、HOMA-IR、HDL-C、TG、TC、LDL-C等均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 4、在實(shí)驗(yàn)組中
　　 (1)所有患者中PPARγ2基因Pro12Ala突變組和非突變組間TC和LDL-C差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05),腰圍、腰臀比、BMI、FPG、FINS、HOMA-IR、TG和HDL-C差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。
　　 (2)按體重指數(shù)

13、分層后肥胖患者中PPARγ2基因Pro12Ala突變組和非突變組間TG、TC和LDL-C差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05),非肥胖組中PPARγ2基因Pro12Ala突變組和非突變組間各指標(biāo)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。
　　 (3)按性別分層后兩組間PPARγ2基因Pro12Ala突變率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,各層中PPARγ2基因Pro12Ala突變組和非突變組間各脂代謝指標(biāo)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。
　　 結(jié)