高密度發(fā)酵制備重組人可溶性TRAIL.pdf

1、TRAIL(TNF-relatedapoptosis-inducingligand)是新近發(fā)現(xiàn)的TNF超家族成員，與TNF-α和FasL一樣能誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡。但TNF-α和FasL的細(xì)胞毒副反應(yīng)太大，他們或可引起致命性炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致膿毒性休克癥，或因引起肝細(xì)胞凋亡而導(dǎo)致致命性肝損傷，無(wú)法應(yīng)用于臨床。TRAIL在多種組織和細(xì)胞中廣泛表達(dá)，有較廣的抗癌譜，其在抗癌作用中突出的特征是只選擇性誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞和轉(zhuǎn)化細(xì)胞發(fā)生凋亡，而對(duì)正常組織和

2、細(xì)胞沒(méi)有顯著毒性效應(yīng)，并且與常規(guī)的放療和化療有協(xié)同增強(qiáng)作用，因而在腫瘤治療中具有很大的應(yīng)用前景。 本文在通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)的方法在搖瓶實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上對(duì)培養(yǎng)TRAIL工程菌的培養(yǎng)基組成進(jìn)行了優(yōu)化，并且在此基礎(chǔ)上在誘導(dǎo)前分別添加鋅離子，氯霉素，增加了TRAIL蛋白的可溶性表達(dá)。并使用5L生物反應(yīng)器進(jìn)行TRAIL工程菌的發(fā)酵培養(yǎng)，每升發(fā)酵液含9.76克干菌體,TRAIL表達(dá)占34％，上清可溶性部分占16％；將裂菌上清先后過(guò)SP-Sepharos