抗DR5單克隆抗體對佐劑型關節(jié)炎大鼠模型的作用分析及機制探討.pdf

1、類風濕性關節(jié)炎(Rheumatoid Arthrifis， RA)是以關節(jié)慢性炎癥為特征的自身免疫性疾病。雖然RA的確切發(fā)病機制還不清楚，但是T細胞、B細胞、巨噬細胞、嗜中性粒細胞和滑膜成纖維細胞在關節(jié)發(fā)炎及疾病發(fā)展的過程中處于重要地位。細胞因子、Th1/Th2細胞平衡、細胞凋亡等在RA的發(fā)病過程中也起著重要作用。RA與滑膜組織中多種淋巴細胞及滑膜成纖維細胞凋亡不足有關，因此誘導這些細胞凋亡防止其過度增殖成為治療RA的有效途徑。

2、 TRAIL(TNF related apoptosis inducing ligand)為II型跨膜蛋白，屬于TNF超家族。TRAIL能誘導表達TRAIL特異性受體的細胞發(fā)生凋亡。DR5又稱TRAIL-R2，是TRAIL的特異性受體，在多種腫瘤組織中高表達。而TRAIL給藥后造成嚴重的肝毒性，限制了它的應用。本實驗室通過可溶性DR5(sDR5)免疫小鼠，建立雜交瘤細胞系，篩選出能誘導細胞凋亡的抗DR5單克隆抗體。該單克隆抗體與DR5

3、特異結合，不與其他TRAIL受體交叉反應。而且該單抗能特異性誘導一些表達DR5的腫瘤細胞凋亡。 為了研究Anti-DR5 mAb對大鼠佐劑型關節(jié)炎(AA)的作用及其免疫機理，本實驗采用注射弗氏完全佐劑的方法建立了佐劑型關節(jié)炎(AA)大鼠模型，尾靜脈注射Anti-DR5 mAb，觀察大鼠關節(jié)腫脹度、血清和滑膜液中炎癥細胞因子IL-1β、TNF-α、IFN-γ水平的變化。另外，利用RT-PCR檢測各組織器官、滑膜和淋巴細胞中DR5

4、mRNA水平的表達，以Western blot技術分析各組織器官中凋亡相關因子Caspase-8、Bcl-2蛋白的表達情況。 實驗發(fā)現(xiàn)Anti-DR5 mAb能緩解AA病情，使關節(jié)腫脹度降低。用Anti-DR5 mAb治療后，血液和滑膜組織細胞產生IL-1β、TNF-α、IFN-γ水平下降，且抑制了滑膜細胞和淋巴細胞的過度增殖。因此，本實驗室制備的Anti-DR5 mAb能用于大鼠AA的治療，其治療機制與細胞表面DR5 mRNA