慢性全腦低灌注大鼠側(cè)腦室旁白質(zhì)改變及MMP-2，3和7的表達.pdf

1、背景：近年來隨著影像學(xué)技術(shù)的發(fā)展，腦白質(zhì)損傷(White matter lesions，WML)在臨床上越來越多地被檢出，目前大量的研究表明腦白質(zhì)損傷與認知功能障礙、癡呆有著密切聯(lián)系。隨著全球人口進入老齡化的社會，認知功能障礙、癡呆給家庭、經(jīng)濟和社會帶來了許多嚴重問題。因此研究腦白質(zhì)損傷的機制，為尋求有效的保護和治療措施提供新的思路，顯得十分有意義。目前的研究表明，缺血是造成腦白質(zhì)損傷的重要原因，但具體的機制仍未十分明確。
　　

2、 目的：⑴采用雙側(cè)頸總動脈分期永久結(jié)扎法建立大鼠慢性全腦低灌注模型，觀察低灌注下大鼠側(cè)腦室旁白質(zhì)的改變，探討該法是否適用于慢性缺血性腦白質(zhì)損傷的實驗研究。⑵檢測大鼠側(cè)腦室旁白質(zhì)基質(zhì)金屬蛋白酶2，3和7(Matrix metalloproteinase-2，3 and7，MMP-2，3 and7)的表達變化并探討其意義。
　　 方法：①清潔級wistar雄性大鼠60只，隨機分為假手術(shù)組1組和模型組3組(20天組、40天組、60天組

3、)，每組各15只，模型組行雙側(cè)頸總動脈分期永久結(jié)扎術(shù)制備慢性全腦低灌注模型。②透射電鏡觀察側(cè)腦室旁白質(zhì)超微結(jié)構(gòu)變化，神經(jīng)髓鞘固藍染色法(Luxol fastblue staining，LFB staining)對腦組織進行髓鞘染色，觀察白質(zhì)的病理改變。膠質(zhì)纖維酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein，GFAP)免疫組化染色觀察星形膠質(zhì)細胞的變化。免疫印跡法檢測側(cè)腦室旁白質(zhì)髓鞘堿性蛋白(Myelinbasi

4、c protein，MBP)的含量變化。③免疫組化染色法和免疫印跡法分別定位和半定量檢測大鼠側(cè)腦室旁白質(zhì)MMP-2，3和7的表達變化。
　　 結(jié)果：⑴電鏡觀察到模型20天組大鼠胼胝體和內(nèi)囊有髓纖維髓鞘發(fā)生變形、板層結(jié)構(gòu)疏松、崩潰等脫髓鞘改變，血管旁明顯水腫現(xiàn)象，而假手術(shù)組未見明顯變化。神經(jīng)髓鞘固藍染色可見各模型組胼胝體和內(nèi)囊出現(xiàn)不同程度脫髓鞘、空泡形成等白質(zhì)損傷改變，而假手術(shù)組未見明顯變化。⑵GFAP免疫組化染色：各模型組胼胝體

5、和內(nèi)囊見星形膠質(zhì)細胞胞體肥大、突觸增粗、數(shù)量增多。經(jīng)半定量分析，各模型組GFAP表達隨低灌注時間延長逐漸增多，較假手術(shù)組差異均有明顯統(tǒng)計學(xué)意義。免疫印跡法檢測MBP水平含量：隨低灌注時間延長，各模型組胼胝體和內(nèi)囊MBP水平逐漸下降，較假手術(shù)組差異均有明顯統(tǒng)計學(xué)意義。⑶各模型組胼胝體和內(nèi)囊MMP-2，3和7表達均較假手術(shù)組增多，MMP-2，3和7表達與側(cè)腦室旁白質(zhì)損傷呈明顯正相關(guān)。
　　 結(jié)論：①分期永久結(jié)扎wistar大鼠雙側(cè)頸