MMP-2 MMP-3 MMP-9在腦缺血中的表達(dá)及意義.pdf

1、前言：細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)由細(xì)胞間的多種蛋白質(zhì)和非蛋白質(zhì)組成,構(gòu)成細(xì)胞生活的微環(huán)境,具有支持、連接、營養(yǎng)和防御等生理作用.基底膜主要由ECM構(gòu)成.基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)是分解細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的蛋白酶類中最重要一類,在基底膜降解中起著主要作用.該研究目的是研究短暫大腦中動(dòng)脈阻塞(MCAO)誘導(dǎo)局灶腦缺血后,MMP-2、MMP-3及MMP-9在不同時(shí)間的表達(dá)及細(xì)胞分布情況.進(jìn)一步評(píng)估MMP-2、MMP-3及MMP-9與缺血腦組織損傷的

2、關(guān)系.材料和方法一、動(dòng)物來源及分組健康雄性Wistar大鼠40只,體重250-280g.隨機(jī)分組(1)對(duì)照組1正常對(duì)照組n=5;2假手術(shù)組n=5;(2)實(shí)驗(yàn)組1-6組,動(dòng)物缺血120分鐘再灌注6小時(shí)為1組;再灌注12小時(shí)為2組;再灌注24小時(shí)為3組;再灌注3天為4組;再灌注5天為5組,再灌注7天為6組;每組n=5.二、大鼠短暫腦缺血?jiǎng)游锬Ｐ徒⒏骨蛔⑸?0％水合氯醛按35mg/100g的制劑注射麻醉.置大鼠仰臥位固定于手術(shù)臺(tái)上,頸正中切

3、開,手術(shù)顯微鏡下分離右側(cè)頸總動(dòng)脈(CCA)、頸外動(dòng)脈(ECA)、頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA),熱凝并切斷ECA兩分支枕動(dòng)脈,甲狀腺上動(dòng)脈,結(jié)扎并游離ECA主干一段,沿ICA分離ICA的頸外分支翼腭動(dòng)脈(PPA),穿線沿其起點(diǎn)結(jié)扎,ECA近端備線,用動(dòng)脈夾暫時(shí)阻斷CCA及ICA,輕輕向下牽拉ECA殘端在ECA剪一小口,將制備好的直徑0.2mm,頭端0.5mm的尼龍線1插入ECA,扎緊備線,放開動(dòng)脈夾,輕輕推進(jìn)尼龍線,經(jīng)CCA分叉處通過ICA入顱至大

4、腦前動(dòng)脈(ACA),斷右側(cè)大腦中動(dòng)脈(MCA)所有血液來源,尼龍線插人深度距分叉為18.5±0.5mm,縫合皮膚,外留1cm長尼龍線頭,缺血時(shí)間為120分鐘,再灌注時(shí)輕輕提拉所留線頭,至到有阻力時(shí)提示尼龍線尖端已至頸外動(dòng)脈殘端.如動(dòng)物已清醒,需再次麻醉后再灌注.假手術(shù)除不插尼龍線外其余步驟同上.結(jié)論：在MCAO/R后MMP-2、MMP-3及MMP-9的表達(dá)是上調(diào)的,陽性細(xì)胞表達(dá)主要集中在缺血區(qū)的內(nèi)皮細(xì)胞、星形細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞.三者表達(dá)有