血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子基因多態(tài)性與上皮性卵巢癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、目的:卵巢惡性腫瘤是女性生殖器三大惡性腫瘤之一,由于其發(fā)病隱匿,缺乏特異性早期發(fā)病指征,往往在確診時(shí)就已發(fā)生轉(zhuǎn)移,因此卵巢癌患者的5年生存率僅30％左右,其死亡率居?jì)D科惡性腫瘤首位。雖然迄今卵巢癌的病因和發(fā)病機(jī)制尚不明確,但已有研究表明,血管生成在包括卵巢癌在內(nèi)的人類實(shí)體腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移中起重要作用。在已知的血管生成因子中,血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)是一種

2、特異的、強(qiáng)烈的血管內(nèi)皮細(xì)胞促分裂因子和血管生成因子,它與腫瘤的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。人類的VEGF基因啟動(dòng)子區(qū)存在一些多態(tài)性位點(diǎn),這些多態(tài)性位點(diǎn)可能通過(guò)改變基因的轉(zhuǎn)錄活性而影響蛋白的表達(dá),導(dǎo)致了人類對(duì)癌癥易感性的個(gè)體差異。本研究旨在探討VEGF基因啟動(dòng)子區(qū)-1154G/A、-460C/T單核苷酸多態(tài)性(singlenucleotide polymorphism,SNP)與上皮性卵巢癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系,從分子生物學(xué)水平為卵巢癌的預(yù)防及診

3、治提供依據(jù)。
　　 方法:本研究采用病例-對(duì)照研究方法,收集303例上皮性卵巢癌患者和303例健康對(duì)照個(gè)體的靜脈抗凝血各5ml,同時(shí)記錄其病史和個(gè)人及家族相關(guān)資料。采用蛋白酶K消化-飽和氯化鈉鹽析法提取外周血白細(xì)胞DNA,采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)分析方法檢測(cè)VEG

4、F基因啟動(dòng)子區(qū)-1154G/A、-460C/T基因多態(tài)位點(diǎn)的基因型頻率分布。
　　 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS11.5版軟件包(SPSS Company,Chicago,Illinois,USA)進(jìn)行。病例組與對(duì)照組的年齡差異行t檢驗(yàn)。比較各位點(diǎn)基因型頻率的觀察值與預(yù)期值并進(jìn)行卡方檢驗(yàn)行Hardy-Weinberg平衡分析。兩組間的基因型分布比較采用行×列表x2檢驗(yàn)。以非條件Logistic回歸法計(jì)算表示相對(duì)風(fēng)險(xiǎn)度的比值比(odd

5、s ratio,OR)及95％可信區(qū)間(confidenceinterval,CI)。采用EH軟件和2LD軟件分別分析VEGF基因啟動(dòng)子區(qū)-460C/T,-1154 G/A2個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)的單倍型頻率和等位基因連鎖不平衡狀態(tài)。P＜0.05作為差異有顯著性的標(biāo)準(zhǔn)。
　　 結(jié)果:
　　 1.健康對(duì)照組中VEGF基因啟動(dòng)子區(qū)-1154G/A、-460C/T兩個(gè)多態(tài)位點(diǎn)基因型頻率分布均符合Hardy-weinberg平衡(P＞0.

6、05)。
　　 2.在卵巢癌組和對(duì)照組中,VEGF基因啟動(dòng)子區(qū)-1154G/A多態(tài)的三種基因型頻率(A/A、G/A、G/G)分別是1.7％、17.8％、80.5％和2.3％、26.1％、71.6％,兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.037);在卵巢癌組和對(duì)照組中,等位基因頻率分布(G、A)分別是89.4％、10.6％和84.7％、15.3％,兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.013);與G/A+A/A基因型相比,攜帶G/G基因型

7、可能明顯增加上皮性卵巢癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)(OR=1.64,95％CI=1.12～2.39)。
　　 3.VEGF基因啟動(dòng)子區(qū)-460C/T多態(tài)C、T等位基因頻率在卵巢癌組和對(duì)照組分別為19.3％、21.3％和80.7％、78.7％,兩組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);C/C、C/T、T/T基因型頻率在卵巢癌組和對(duì)照組分別為4.0％、30.7％、65.3％和5.6％、31.4％、63％,兩組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);與

8、C/T+T/T基因型相比,T/T基因型可能與卵巢癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)無(wú)關(guān),OR值為1.11(95％CI=0.79～1.54)。
　　 4.VEGF基因啟動(dòng)子區(qū)-1154G/A和-460C/T SNPs位點(diǎn)間不存在連鎖不平衡(D'=0.426)。
　　 結(jié)論:
　　 1.VEGF基因啟動(dòng)子區(qū)-1154G/A多態(tài)可能與上皮性卵巢癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)明顯相關(guān),即攜帶G/G基因型可能顯著增加上皮性卵巢癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。
　　 2.V