經(jīng)鼻小齊量rhEPO對腦缺血大鼠腦內(nèi)基質(zhì)金屬蛋白酶-9、小窩蛋白-1表達的影響.pdf

1、目的:①觀察經(jīng)鼻內(nèi)給腦缺血大鼠小劑量重組人促紅細胞生成素(thEPO)，其對腦缺血大鼠是否具有腦保護作用，從而進一步驗證鼻內(nèi)給藥方式的可行性。②觀察thEPO對急性腦缺血大鼠腦內(nèi)基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、小窩蛋白．1(Cav-1)表達的影響，探討thEPO的神經(jīng)保護機制，為臨床上應(yīng)用thEPO提供實驗依據(jù)。
　　 方法：90只健康雄性SD大鼠隨機分為3組，即假手術(shù)組、缺血組和thEPO治療組。參照改良的Zea-Longa

2、等的線栓法制作大鼠永久性局灶性腦缺血(pMCAO)模型，thEPO治療組在大鼠腦缺血1小時后經(jīng)鼻內(nèi)給予重組人促紅細胞生成素(48UrhEPO用PBS稀釋至50μL)，缺血組和假手術(shù)組在等時間點給予等體積的生理鹽水（50μL生理鹽水），分別對大鼠進行行為學(xué)評分，24小時后斷頭取出完整的腦組織，干濕質(zhì)量法測腦組織含水量，伊文思藍(EB)法測血腦屏障的通透性，2,3,5．氯化三苯基四氮唑(TTC)法測量腦梗死體積，免疫組織化學(xué)方法測定MMP-

3、9、Cav-1蛋白的表達。
　　 結(jié)果：①腦缺血缺氧后，大鼠的腦含水量和EB含量增加，腦梗死面積大，與缺血組相比，腦缺血1h后經(jīng)鼻給小劑量thEPO治療組顯示，腦含水量、EB含量明顯減少，梗死面積明顯減小，差別有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 ②免疫組化測定MMP-9、Cav-1蛋白的表達：假手術(shù)組MMP-9僅見微弱表達，缺血組可見大量的表達，thEPO治療組與缺血組相比，陽性細胞數(shù)表達明顯下降；缺血缺氧后，Cav-1的表達增加，本