不同方法控制性降壓對大鼠認知功能的影響.pdf

1、目的：觀察不同方法控制性降壓對大鼠腦海馬A8、S-100β表達和學(xué)習(xí)記憶的影響,研究圍術(shù)期控制性降壓對術(shù)后認知功能障礙的影響和可能機制。
　　 方法：運用Y-型電迷宮測試,記錄大鼠訓(xùn)練后測試正確反應(yīng)率(right number,RN)和全天總反應(yīng)時間(total reaction time,TRT),計算其均值,篩選學(xué)習(xí)記憶功能正常的雄性SD大鼠128只。隨機分為四組：對照組(A組),異氟烷Ⅰ組(B組),異氟烷Ⅱ組(C組),異氟

2、烷+硝普鈉組(D組),每組32只大鼠。分四個時間點：麻醉后即刻(A組為麻醉前)、麻醉后1、3、7天,以下標0、1、3、7表示,各取8只大鼠。上述四組分別于行水合氯醛腹腔注射麻醉后,套管針氣管插管,動物呼吸機控制呼吸,使用動物無創(chuàng)血壓測試儀監(jiān)測大鼠尾動脈血壓,待血壓穩(wěn)定20分鐘(min)后開始降壓。A組不做降壓處理,采用0.9％氯化鈉注射液連續(xù)泵注;B組0.9％氯化鈉連續(xù)泵注,1-1.5％異氟烷吸入麻醉,血壓維持在大鼠正常生理范圍,持續(xù)4

3、小時(h),麻醉后即抽取動脈血0.6ml行血氣分析;C組0.9％氯化鈉連續(xù)泵注,3～4％異氟烷吸入10～15min達到目標血壓,即MAP50mmHg,控制性降壓持續(xù)4h,降壓結(jié)束后即抽取動脈血0.6ml行血氣分析;D組0.9％氯化鈉液配制成400μg/ml硝普鈉(SNP),1～1.5％異氟烷吸入麻醉,10～15min達到目標血壓,即MAP50mmHg,降壓過即程中根據(jù)血壓變化調(diào)整泵速,控制性降壓持續(xù)4h,降壓結(jié)束后即抽取動脈血0.6ml

4、行血氣分析。上述四組采用白熾燈直接照射大鼠,保持肛溫37.0±0.5℃。控制性降壓組術(shù)后即刻斷頸取腦海馬組織(n=8)、控制性降壓術(shù)后1(n=8)、3(n=8)、7(n=8)天利用Y迷宮進行認知功能的測定,測試后各時間點隨機取4只大鼠斷頸取腦海馬組織-70℃凍存,采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗,檢測海馬內(nèi)A8抗體表達水平;4只以4％多聚甲醛150-200ml灌注固定后頸取腦海馬組織,采用免疫組化觀察S-100β免疫反應(yīng)陽性細胞表達并進行

5、陽性細胞計數(shù)。
　　 結(jié)果：麻醉前四組大鼠生理指標和學(xué)習(xí)記憶功能組間無顯著性。①麻醉后1天正確反應(yīng)次數(shù)為：B112.43±3.29次、C18.39±2.87次、D110.89±3.65次,小于A1組13.64±2.76次;全天總反應(yīng)時間為：B174.83±44.37秒、C193.38±51.35秒、D181.41±43.24秒,大于A168.42±33.27秒。麻醉后3天、7天四組間正確反應(yīng)次數(shù)和全天總反應(yīng)時間無顯著差異。②麻醉

6、后即刻Aβ抗體：C00.097±0.0045,明顯高于B00.072±0.0073、D00.07±0.0055、A00.068±0.0062;麻醉后1天Aβ抗體C10.098±0.0075,明顯高于A10.066±0.0069、B10.073±0.0052、D10.075±0.0057,差異有非常顯著性,A1、B1、D1組間無顯著差異(P＞0.05);麻醉后3天、7天四組Aβ抗體組間無顯著差異。③麻醉后即刻C0組大鼠海馬各區(qū)S-100β

7、陽性細胞均明顯增多,密度高于A0、B0、D0組,差異有非常顯著性,A0、B0、D0組密度無顯著差異;麻醉后1天C1組海馬各區(qū)S-100β陽性細胞均明顯增多,密度明顯高于A1、B1、D1組,差異有非常顯著性,A1、B1、D1組間無顯著差異(P＞0.05);麻醉后3天、7天B、C、D組海馬各區(qū)S-100β陽性細胞密度降低,四組間無顯著差異。
　　 結(jié)論：
　　 1.以單純吸入3-4％異氟烷4小時控制性降壓,影響大鼠腦海馬Aβ