人巨細胞病毒在顱咽管瘤中的感染、表達及意義.pdf

1、人巨細胞病毒(HCMV)是一種β皰疹病毒。近年來的研究顯示在人類多種類型腫瘤組織中存在HCMV感染和病毒基因表達,并可能與腫瘤的惡性程度有關,這提示HCMV感染可能在人類某些類型腫瘤的形成和發(fā)展過程中扮演著重要的角色,有可能是一種新的人類腫瘤相關病毒。HCMV基因產(chǎn)物可通過多種細胞信號通路抑制細胞凋亡、促進細胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移,也能促進微血管的生成及血管壁的損害,并形成獨特的免疫逃避機制躲避機體的免疫反應。深入研究HCMV感染與腫瘤的病

2、因?qū)W關系及其作用機制,可為腫瘤的臨床防治提供新思路。
　　顱咽管瘤是兒童和青少年最常見的顱內(nèi)先天性腫瘤,約占顱內(nèi)腫瘤的4％。顱咽管瘤的臨床表現(xiàn)通常復雜且嚴重,治療很棘手,手術往往難以徹底切除,放化療效果較為有限,腫瘤復發(fā)率高,預后差。目前有關顱咽管瘤的病因?qū)W和發(fā)病機制尚不完全清楚,這也是臨床上缺乏有效防治方法的一個重要因素。HCMV感染是否與其發(fā)生有關,國內(nèi)外尚未見報道。
　　本實驗采用免疫組化方法和real-timePCR

3、方法分別檢測顱咽管瘤組織和正常腦組織中HCMV抗原表達情況和基因含量水平,分析HCMV感染與顱咽管瘤發(fā)生發(fā)展及臨床特征的相關性。
　　第一部分顱咽管瘤組織中人巨細胞病毒抗原表達的檢測
　　1.方法:
　　2006年6月至2010年12月在西京醫(yī)院神經(jīng)外科行手術切除且經(jīng)病理確診為顱咽管瘤的患者89例,及行顱內(nèi)高壓造瘺手術部分切除的正常腦組織10例。以上手術均由有豐富經(jīng)驗的術者完成,在手術中收取適量標本,迅速放入足量甲醛溶

4、液中固定;充分固定后,石蠟包埋,切片厚4μm,二氨基聯(lián)苯胺(DAB)染色,蘇木素復染,檢測HCMV立刻早期蛋白1-72和磷酸化糖蛋白65抗體的表達情況,進而探討HCMV感染與顱咽管瘤發(fā)生發(fā)展的關系。
　　2.結果:
　　1.HCMV抗原在顱咽管瘤和正常人腦組織中的表達
　　HCMVIE1-72和pp65抗原在顱咽管瘤細胞的胞漿和胞核中都有棕黃色或棕褐色均質(zhì)顆粒,在腫瘤組織上皮細胞中呈不均勻分布。顱咽管瘤組織中HCMVI

5、E1-72和pp65抗原陽性率分別為77.5%和84.3%,而正常人腦組織全為陰性。HCMVIE1-72和pp65抗原表達陽性率在顱咽管瘤組織和正常人腦組織之間均有顯著性差異(χ2=22.045,P=0.000;χ2=30.324,P=0.000)。
　　2.HCMV抗原表達與顱咽管瘤臨床病理學特征的關系
　　HCMVIE1-72抗原在牙釉質(zhì)型和鱗狀乳頭型顱咽管瘤組織中陽性率分別為83.6%和67.6%,pp65抗原在牙釉質(zhì)

6、型和鱗狀乳頭型顱咽管瘤組織中陽性率分別為89.1%和76.5%;兩抗原在牙釉質(zhì)型顱咽管瘤組織中的陽性率均略高于鱗狀乳頭型,但差異均無顯著性(χ2=2.234,P=0.135;χ2=1.662,P=0.197)。IE1-72抗原男性陽性率為81.6%,女性為72.5%;pp65抗原男性陽性率為81.6%,女性為87.5%;IE1-72和pp65兩抗原陽性率在性別間有差異,但差異無顯著性(χ2=0.595,P=0.440;χ2=0.215,

7、P=0.643),IE1-72和pp65兩抗原陽性率與患者年齡亦無明顯相關性(r=0.009,P=0.930;r=0.056,P=0.599)。
　　3.結論:
　　1.顱咽管瘤組織中HCMV抗原表達陽性率顯著高于正常腦組織,提示HCMV感染可能是一個誘發(fā)顱咽管瘤發(fā)生的重要病因,并有可能促進腫瘤的演變。這對于臨床預防和治療顱咽管瘤有一定的啟示作用。
　　2.HCMV抗原表達陽性率在牙釉質(zhì)型和鱗狀乳頭型顱咽管瘤組織間差異

8、無顯著性,但牙釉質(zhì)型略高于鱗狀乳頭型,仍提示HCMV感染可能與顱咽管瘤的不同病理組織類型發(fā)生及演變有關;在男女性別間有差異,但無顯著性,這與HCMV感染流行病學特征女性感染率高于男性不一致,可能與本組樣本量較小及實驗方法有關,也可能顱咽管瘤組織HCMV抗原表達與性別有一定關系。其致病機理需要進一步研究。
　　第二部分人巨細胞病毒基因在顱咽管瘤組織中的定量檢測
　　1.方法:
　　在擬診為顱咽管瘤的患者進行手術的過程中收

9、集適量新鮮的病變組織,立即放入液態(tài)氮中冷凍,然后存于—80℃冰箱中備用。手術均由有豐富經(jīng)驗的術者完成。以病理報告為主要依據(jù),排除非顱咽管瘤的標本,完全囊變組織標本和全鈣化組織標本,共收集9例。定量檢測HCMV基因在顱咽管瘤組織中的含量,進一步明確HCMV感染與顱咽管瘤發(fā)生發(fā)展的關系。
　　2.結果:
　　9例組織中HCMV基因定量全為陰性,但其中1例有陽性趨勢,提示HCMV核酸有可能存在于顱咽管瘤組織中,但含量甚微,以至難以