甘草酸二銨對(duì)腦死亡狀態(tài)下大鼠肝臟影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一章：大鼠腦死亡模型的建立及相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究
　　 目的:應(yīng)用顱內(nèi)高壓法建立大鼠腦死亡模型來(lái)復(fù)制臨床腦死亡狀態(tài)，并將爆發(fā)式和漸進(jìn)式顱內(nèi)高壓腦死亡模型進(jìn)行比較，為研究腦死亡提供穩(wěn)定、簡(jiǎn)便、可重復(fù)和可控制的建模方式。
　　 方法:SD大鼠30只，隨機(jī)分為對(duì)照組(A組)10只、爆發(fā)式腦死亡組(B組)10只和漸進(jìn)式腦死亡組(C組)10只，A組在麻醉后行動(dòng)脈插管、氣管插管及顱骨鉆孔置管，但不行顱內(nèi)加壓。B組麻醉后行動(dòng)脈插管、氣管插管

2、及顱骨鉆孔置管，后行顱內(nèi)球囊以16μl/min的速度加壓。C組麻醉后行動(dòng)脈插管、氣管插管及顱骨鉆孔置管，后行顱內(nèi)球囊以4μl/min的速度加壓，在呼吸機(jī)維持下，生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)監(jiān)測(cè)大鼠腦死亡狀態(tài)6 h，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中監(jiān)測(cè)動(dòng)脈壓及心率的變化，并比較建模手術(shù)成功率。
　　 結(jié)果:腦死亡組建立了顱內(nèi)高壓腦死亡模型，并誘導(dǎo)成功16只，誘導(dǎo)后期動(dòng)脈壓及心率驟然升高，后逐漸下降，其中B組急劇下降，幅度明顯，且有3只因動(dòng)脈壓過(guò)低剔除研究，而C組下

3、降幅度緩慢；與A組比較，腦死亡組谷值和峰值時(shí)動(dòng)脈壓及心率的差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，手術(shù)成功率B組70％(7/10)小于C組90％(9/10)。
　　 結(jié)論:應(yīng)用顱內(nèi)高壓法能成功建立穩(wěn)定可靠的大鼠腦死亡模型，其中漸進(jìn)式顱內(nèi)高壓腦死亡模型有更高的手術(shù)成功率。
　　 第二章：腦死亡狀態(tài)對(duì)大鼠肝臟損傷的實(shí)驗(yàn)研究
　　 目的:建立大鼠顱內(nèi)高壓腦死亡模型，并觀察腦死亡狀態(tài)對(duì)肝臟形態(tài)、功能及免疫原性的影響，為探討改善腦死亡供體器

4、官質(zhì)量提供理論依據(jù)。
　　 方法:SD大鼠24只，隨機(jī)分為對(duì)照組(12只)和腦死亡組(12只)，對(duì)照組在麻醉后行動(dòng)脈插管、氣管插管及顱骨鉆孔置管，但不行顱內(nèi)加壓。腦死亡組建立漸進(jìn)式顱內(nèi)高壓腦死亡模型，呼吸機(jī)維持下，在腦死亡誘導(dǎo)成功后分別于0h、2h、4h、6h取標(biāo)本，抽血測(cè)ALT、AST，肝組織行組織病理學(xué)檢查，免疫組化法檢測(cè)腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及主要組織相容性復(fù)合體-Ⅱ(MHC-Ⅱ)的表達(dá)，對(duì)照組麻醉維持，在對(duì)應(yīng)時(shí)間

5、點(diǎn)取標(biāo)本進(jìn)行比較。
　　 結(jié)果:腦死亡組中血清ALT及AST的水平和肝組織TNF-α及MHC-Ⅱ的表達(dá)水平均較對(duì)照組升高，腦死亡誘導(dǎo)后肝組織病理學(xué)檢查示肝細(xì)胞變性，而且隨著誘導(dǎo)時(shí)間的延長(zhǎng)，變化越明顯。腦死亡組與對(duì)照組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的檢測(cè)水平差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論:大鼠腦死亡狀態(tài)對(duì)肝臟形態(tài)及功能有損傷性變化，且能促進(jìn)TNF-α及MHC-Ⅱ的表達(dá)，隨著腦死亡狀態(tài)維持越長(zhǎng)，損傷程度越重，表達(dá)越明顯。<

6、br>　　 第三章：甘草酸二銨對(duì)腦死亡大鼠肝臟保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究
　　 目的:建立大鼠顱內(nèi)高壓腦死亡模型，誘導(dǎo)成功后給予甘草酸二銨注射液來(lái)研究其對(duì)腦死亡肝臟的保護(hù)作用，并探討甘草酸二銨低濃度、中濃度和高濃度三種不同劑量對(duì)腦死亡肝臟保護(hù)作用的強(qiáng)弱，為臨床研究腦死亡供體保護(hù)提供重要理論依據(jù)。
　　 方法:將25只SD大鼠隨機(jī)分為三組：對(duì)照組(A組)5只、腦死亡組(B組)5只和甘草酸二銨處理組(C組)15只，A組在麻醉后行動(dòng)

7、脈插管、氣管插管及顱骨鉆孔置管，但不行顱內(nèi)加壓。B組與C組建立漸進(jìn)式顱內(nèi)高壓腦死亡模型，C組在腦死亡誘導(dǎo)后從股靜脈泵人甘草酸二銨注射液，給予劑量分別為10mg/kg(低濃度)、20mg/kg(中濃度)和30mg/kg(高濃度)，每個(gè)劑量組各5只，在腦死亡誘導(dǎo)后4h取標(biāo)本，各組下腔靜脈取血檢測(cè)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)和天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)，取肝組織行}玎巳染色及免疫組化法檢測(cè)腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及主要組織相容性復(fù)合體

8、-Ⅱ(MHC-Ⅱ)的表達(dá)，TUNEL法檢測(cè)肝細(xì)胞凋亡。
　　 結(jié)果:B組及C組中血清ALT及AST的水平、肝組織TNF-α及MHC-Ⅱ的表達(dá)水平和肝組織細(xì)胞凋亡指數(shù)AI均較A組升高；C組中血清ALT及AST的水平、肝組織TNF-α及MHC-Ⅱ的表達(dá)水平和肝組織細(xì)胞凋亡指數(shù)AI均較B組低，而且C組中中濃度組降低更明顯；腦死亡誘導(dǎo)后B組及C組肝組織病理學(xué)檢查示肝細(xì)胞變性；C組肝組織病理學(xué)檢查示肝細(xì)胞變性較B組少，且中濃度組減少更明顯