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文檔簡介
1、目的:測試課題組改良的納米基因載體的理化參數(shù),并觀察其體外基因轉(zhuǎn)染的性能。
方法:通過化學(xué)共沉淀-水熱合成法合成羥基磷灰石納米顆粒,用PEI做表面修飾以提高羥基磷灰石納米載體的DNA結(jié)合能力和轉(zhuǎn)染效率,并應(yīng)用穿透肽進(jìn)一步提高其基因轉(zhuǎn)染率。通過透射電鏡觀察納米顆粒的形態(tài)和粒徑、測定修飾前后的納米羥基磷灰石在室溫的懸浮穩(wěn)定性、與DNA的結(jié)合和保護(hù)能力及體外細(xì)胞轉(zhuǎn)染能力.
結(jié)果:1)制備改良的羥基磷灰石納米顆粒,有較高的D
2、NA結(jié)合力(與DNA結(jié)合的質(zhì)量比為50∶1)。
2)經(jīng)PEI修飾后的nHAP具有更好的懸浮穩(wěn)定性、DNA結(jié)合力更高(與DNA結(jié)合的質(zhì)量比為12.5∶1),體外細(xì)胞轉(zhuǎn)染率由原來的1.83%提升至8.14%。
3)通過穿透肽進(jìn)一步將轉(zhuǎn)染效率提升至10.12%。
結(jié)論:1)經(jīng)PEI修飾的羥基納米磷灰石載體的懸浮穩(wěn)定性和DNA結(jié)合能力都要優(yōu)于單純羥基納米磷灰石顆粒。
2)結(jié)合穿透肽后,可進(jìn)一步提高PEI修
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