氣態(tài)甲醛暴露對(duì)卵清蛋白免疫的Balb-c小鼠哮喘發(fā)生的影響.pdf

1、哮喘是一種常見的、影響廣大的疾病，其主要病理學(xué)特征“氣道變應(yīng)性炎癥”通常被認(rèn)為是與過敏體質(zhì)和過敏原直接相關(guān)的。近年來，時(shí)常有研究發(fā)現(xiàn)，除過敏體質(zhì)之外，環(huán)境因素對(duì)于哮喘的發(fā)生也有一定的影響，而且這種影響雖然并沒有能完全被證實(shí)，但是不容小覷。甲醛是一種常見的室內(nèi)裝修污染物，這些年來不乏關(guān)于甲醛的多種生物毒性及對(duì)人類健康的影響的研究，并不斷有研究表明，甲醛暴露能夠引起人的哮喘現(xiàn)象或類似于哮喘的癥狀。為了探討氣態(tài)甲醛能否參與誘發(fā)哮喘和及其在哮喘

2、發(fā)病機(jī)理方面的作用，本課題進(jìn)行了體內(nèi)和體外兩方面的實(shí)驗(yàn)。
　　 體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，將Balb/c小鼠隨機(jī)分為6組：生理鹽水組、卵清白蛋白(OVA)致敏組、氣態(tài)甲醛(0.5mg/m3、3.0mg/m3)與OVA聯(lián)合作用組，氣態(tài)甲醛(0.5mg/m3、3.0mg/m3)單獨(dú)作用組，每組6只，用OVA致敏加激發(fā)的方法制作小鼠哮喘模型。而后測(cè)定小鼠在不同劑量的乙酰甲膽堿(MCH)激發(fā)作用下的肺功能指數(shù)，包括：氣道吸氣阻力(Ri)，氣道呼氣阻力

3、(Re)，肺的順應(yīng)性(Cldyn)；取肺泡盥洗液做嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)，另取一側(cè)肺組織制作石蠟切片，另一側(cè)肺勻漿后測(cè)定IL-4、IL-6及IFN-γ含量。結(jié)果顯示，與OVA組相比，氣態(tài)甲醛暴露和OVA聯(lián)合作用組小鼠氣道高反應(yīng)性顯著增強(qiáng)，肺的病理變化現(xiàn)象更為明顯，嗜酸性粒細(xì)胞占白細(xì)胞總數(shù)的比例增加，IL-4、IL-6含量明顯升高。由此說明氣態(tài)甲醛能夠惡化哮喘模型小鼠的哮喘癥狀，可誘導(dǎo)哮喘的發(fā)生。而且與生理鹽水組相比，氣態(tài)甲醛暴露組，尤其是高濃

4、度甲醛暴露組的嗜酸性粒細(xì)胞占白細(xì)胞總數(shù)的比例也有明顯的增加。
　　 體外實(shí)驗(yàn)中，本研究選擇Balb/c的氣管作離體的氣管平滑肌細(xì)胞(ASMC)原代培養(yǎng)，經(jīng)鑒定后，采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力。首先用不同濃度的甲醛溶液染毒氣管平滑肌細(xì)胞，篩選能夠?qū)υ摷?xì)胞活力產(chǎn)生不利的影響但又不至于引起非可逆的致死性影響的甲醛溶液濃度。然后將該濃度的甲醛與小鼠細(xì)胞因子IL-4聯(lián)合作用于氣管平滑肌細(xì)胞。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與空白對(duì)照組相比，單獨(dú)的甲醛溶液染毒能夠引

5、起氣管平滑肌細(xì)胞活力的降低，單獨(dú)的細(xì)胞因子IL-4作用能夠顯著的刺激細(xì)胞活力的增長，二者聯(lián)合作用時(shí)，仍能刺激平滑肌細(xì)胞活力的增長。
　　 因此，通過以上的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，甲醛這種小分子，作為一種環(huán)境因此，確實(shí)能對(duì)哮喘的發(fā)生產(chǎn)生影響。結(jié)合最近的研究，我們推斷，甲醛的參與可能是通過兩種方式參與哮喘的發(fā)生過程的。一是甲醛可能以類似免疫“佐劑”的身份加劇了哮喘的癥狀。這可以通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中氣態(tài)甲醛與卵清蛋白OVA共同作用組的氣道高反應(yīng)，

6、嗜酸性粒細(xì)胞比例的上漲，細(xì)胞因子的量的增加，組織切片中氣道重塑的惡化這一系列反應(yīng)得到證實(shí)。另一方面，甲醛本身的刺激作用也發(fā)揮了影響，這可從單獨(dú)的甲醛作用組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果得到證實(shí)。雖然甲醛單獨(dú)暴露組的氣道高反應(yīng)性和組織切片的變化并不顯著，但是嗜酸性粒細(xì)胞比例，IL-4和IL-6的含量有明顯的上升，說明甲醛充分發(fā)揮了自身的促炎癥作用，從而使得哮喘的發(fā)生易化。同時(shí)，IFN-γ的含量沒有明顯的變化，說明本研究中Th1/Th2細(xì)胞群的平衡發(fā)生了變化，