丹皮酚對血管成形術后內膜增生及血管重塑的影響.pdf

1、目的：
　　采用球囊損傷腹主動脈結合高脂喂養(yǎng)的方法建立兔動脈粥樣硬化(AS)模型,再行球囊擴張術建立兔血管成形術(PTA)后再狹窄(RS)模型,術后予丹皮酚(Paeonol,Pae)干預,觀察丹皮酚對血管成形術后再狹窄的作用并探討其機制。
　　材料與方法：
　　普通級成年雄性新西蘭大白兔40只,體重(2.5士3.0)kg,隨機取其中6只予普通飼料喂養(yǎng)并行假手術作為假手術陰性對照組,其余予高脂喂養(yǎng)8周,同時行腹主動脈球囊

2、損傷術剝脫血管內皮,建立兔動脈粥樣硬化模型。8周后從球囊損傷術后兔中隨機選取6只處死、取材,同時將假手術組6只兔處死,取材,兩組比較證明動脈粥樣硬化建模成功。之后行球囊擴張術,建立血管成形術后再狹窄模型。在喂養(yǎng)及術中共死亡4只兔,余24只分為四組,每組6只,分別為模型組(生理鹽水2ml/kg·d+普通飼料)、低劑量丹皮酚組(丹皮酚75mg/kg·d+普通飼料)、高劑量丹皮酚組(150mg/kg·d+普通飼料)、纈沙坦組(10mg/kg·

3、d+普通飼料),灌胃4周后,處死動物、取材、切片。實驗內容:①切片行HE、Masson染色;②mmp-2、bcl-2采用免疫組化染色;③細胞凋亡行原位雜交(TUNEL法)染色。圖像分析:①對HE、Masson染色片進行血管形態(tài)計量分析;②免疫組化和凋亡染色片予計數單個視野內陽性細胞占視野內全部細胞百分比衡量其各自的表達。
　　結果：
　　1.血管形態(tài)學分析結果:模型組可見血管內膜明顯增生,管腔狹窄,大量膠原纖維增生。用藥組與

4、模型組相比,內膜增生明顯受抑制,內膜面積(IA)減少,管腔面積(LA)增大,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),同時發(fā)現(xiàn)用藥組較模型組膠原增生減少,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。兩組Pae組(高Pae組與低Pae組)與纈沙坦組相比,上述各指標有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。中膜面積,兩組Pae組與模型組相比,無明顯統(tǒng)計學差異(P>0.05)。兩組Pae組與纈沙坦組相比,有明顯統(tǒng)計學意義(P<0.05)。低Pae組與高Pae組相比,二者

5、差異無明顯統(tǒng)計學差異(P>0.05)。同時各用藥組LA變化值較對應IA變化值明顯增大,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　2.TUNEL染色細胞凋亡圖像分析結果:模型組凋亡細胞散在分布,數量較少,用藥組與模型組相比,凋亡細胞明顯增多,多集中于血管內膜,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。但低Pae組與高Pae組相比,二者無明顯統(tǒng)計學差異(P>0.05),同時兩組Pae組與纈沙坦組相比,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　

6、　3.mmp-2、bcl-2免疫組化圖像分析:模型組mmp-2及bcl-2陽性細胞主集中于內膜靠近管腔側,分布較多,用藥組分別與模型組相比,陽性細胞分布明顯減少,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。但低Pae組與高Pae組相比,二者無明顯統(tǒng)計學差異(P>0.05),同時兩組Pae組與纈沙坦組相比,有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。
　　結論：
　　1.丹皮酚通過抑制膠原的過度沉積,抑制PTA術后內膜增厚及血管重塑的發(fā)生。