心肌梗死后大鼠左心室肌細胞鈣濃度的改變及夾竹桃麻素的干預作用研究.pdf

1、目的：探討心肌梗死后大鼠左心室肌細胞鈣濃度的改變及夾竹桃麻素的干預作用。
　　方法：1.選擇體重230～260g健康雄性SD（Sprague Dawley）大鼠共90只，稱重后用10%水合氯醛腹腔注射麻醉并行氣管插管，開胸結(jié)扎左冠狀動脈前降支建立心肌梗死模型，假手術組（sham組）僅將縫線穿過前降支而不結(jié)扎。將心肌梗死大鼠隨機分為2個亞組，一組接受夾竹桃麻素（15mg/kg/d）灌胃給藥5周，設為心梗干預組（MI干預組），另一組給

2、予等體積生理鹽水灌胃5周，設為心肌梗死組（MI組）。第6周時將大鼠稱重后行腹腔麻醉，迅速開胸取出心臟，應用酶解法分離獲得單個左心室肌細胞用于膜片鉗實驗及心肌細胞內(nèi)鈣濃度測定，其中sham組5只，MI組6只，MI干預組6只。
　　2、采用酶解法分離獲得單個左心室肌細胞，應用膜片鉗全細胞記錄技術記錄三組大鼠左心室肌細胞膜電容（Cm）和L-型鈣通道電流（ICa-L），測定每一刺激電壓下的電流幅值并計算每一刺激電壓下的電流密度，將每一刺激

3、電壓下的最大電流密度繪制成電流密度-電壓（I-V）曲線，并計算ICa-L的激活、失活時間常數(shù)。
　　3、采用酶解法分離獲得單個左心室肌細胞，應用熒光探針 Fura-2/AM測定心室細胞內(nèi)鈣離子濃度。
　　結(jié)果：1、Sham組左心室肌細胞膜電容為（190.92±14.55）pF（n=12），MI組為（290.13±22.10）pF（n=10），二組間比較差異顯著（P<0.01）；MI干預組為（201.26±13.20）pF（n

4、=11），顯著低于MI組（P<0.01），雖然高于sham組，但無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　2、三組左心室肌細胞ICa-L在0mv電壓下電流密度分別為，sham組為（7.94±0.36） pA/pF（n=12），MI組為（5.88±0.74）pA/pF（n=10），兩者比較有統(tǒng)計學意義（P<0.01），MI干預組為（7.40±0.41）pA/pF（n=11），與MI組相比，其電流密度顯著增加（P<0.01），比sham組電

5、流密度低，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。三組ICa-L的激活電壓均為-40mv，峰值電壓為0mv，反轉(zhuǎn)電壓為+50mv，sham組、MI組及MI干預組ICa-L激活時間常數(shù)分別為（6.41±0.72）ms、（6.57±0.64）ms和（6.21±0.68）ms；快、慢失活時間常數(shù)分別為（7.82±2.33）ms、（82.56±4.17）ms；（7.54±2.95）ms、（81.39±3.76）ms；（7.62±2.58）ms、（83

6、.06±4.76）ms，均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　3、Sham組左心室肌細胞內(nèi)Ca2+濃度為（168.57±80.46）nmol/L（n=14），MI組為（381.21±84.19）nmol/L（n=10），二組間比較差異顯著（P<0.01）；MI干預組為（245.79±92.11）nmol/L（n=10），顯著低于MI組（P<0.01），高于sham組，但無顯著性差異。
　　結(jié)論:
　　1. MI組大鼠左

7、心室非梗死區(qū)心肌細胞膜電容較sham組明顯增高，應用夾竹桃麻素干預后顯著下降，表明抑制NADPH氧化酶可減輕心肌梗死后大鼠左心室肌細胞肥大。
　　2.MI組大鼠左心室非梗死區(qū)心肌細胞0mv時ICa-L電流密度較sham組顯著降低， I-V曲線明顯上移，應用夾竹桃麻素后ICa-L電流密度明顯升高，表明抑制NADPH氧化酶可減輕心肌梗死后大鼠左心室肌細胞ICa-L重構(gòu)。
　　3.MI組大鼠左心室非梗死區(qū)心肌細胞內(nèi)鈣濃度較sham