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文檔簡介
1、目的:研究apelin-13對人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)與單核細胞(MCs)粘附的作用及其PI3K/14-3-3信號轉導機制,探討apelin-APJ系統(tǒng)新的生理功能及其信號轉導機制。
方法:培養(yǎng)HUVECs和MCs;MPO法檢測apelin-13對HUVECs與MCs粘附的影響;Western Blotting檢測apelin-13對HUVECs VCAM-1、p-PI3K、PI3K和14-3-3表達。
結果
2、:Apelin-13(0、0.5、1、2、4μmol/L)濃度依賴性促進HUVECs與MCs粘附,在1μmol/L時粘附達到峰值,1μmol/L apelin-13(0,3,6,12,24,48h)時間依賴性促進 HUVECs與MCs粘附,在刺激12h時粘附達到峰值;apelin-13(0、0.5、1、2、4μmol/L)濃度依賴性促進HUVECs粘附分子VCAM-1表達,在1μmol/L時作用達到峰值,1μmol/L apelin-1
3、3(0,3,6,12,24,48h)時間依賴性促進HUVECs粘附分子VCAM-1表達,在刺激12h時作用達到峰值。PI3K的特異性抑制劑 LY294002和14-3-3抑制劑 Difopein明顯抑制apelin-13誘導HUVECs與MCs粘附,一氧化氮合酶抑制劑 LNNA促進了apelin-13誘導HUVECs與MCs粘附。Apelin-13(0、0.5、1、2、4μmol/L)濃度依賴性誘導HUVECs PI3K磷酸化及14-3
4、-3表達,于1μmol/L時作用達到峰值,1μmol/L apelin-13時間依賴性誘導HUVECs PI3K磷酸化及14-3-3表達,分別于刺激30min,5min時作用達到峰值;PI3K的特異性抑制劑LY294002和14-3-3抑制劑Difopein明顯抑制apelin-13誘導HUVECs PI3K磷酸化及14-3-3和VCAM-1表達;apelin-13、LY294002和Difopein對HUVECs PI3K的表達無影響
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