oxHDL3對人臍靜脈內(nèi)皮細胞t-PA表達的影響.pdf

1、目的:
　　探討oxHDL3對人臍靜脈內(nèi)皮細胞株 HUVEC-12細胞組織型纖溶酶原激活物(tissue type plasminogen activator,t-PA)表達的影響及其相關(guān)機制。
　　方法:
　　HUVEC-12細胞分別經(jīng)不同濃度(0、20、40、80、120mg/L)、不同時間(0、6、12、24、48h)HDL3、oxHDL3孵育,采用RT-PCR、ELISA和免疫細胞化學(xué)的方法檢測t-PA表達情況

2、。用Western-blot免疫印跡方法檢測HDL3、oxHDL3對Phospho-p38 MAPK和細胞核內(nèi)NF-κBp65含量的影響。分別用p38 MAPK和NF-κB的特異性抑制劑SB203580和BAY11-7085來探討HDL3、oxHDL3影響HUVEC細胞t-PA表達的機制。
　　結(jié)果:
　　1.與0mg/ L oxHDL3組比較,oxHDL3呈劑量和時間依賴性下調(diào)t-PA mRNA的表達,以80mg/ L濃度

3、組和oxHDL324h組減少最明顯,較0mg/ L oxHDL3組分別下降了30％和19%(均P<0.05);ELISA結(jié)果顯示,oxHDL3也呈劑量和時間依賴性減少了細胞培養(yǎng)液中t-PA的含量,以80mg/L濃度組和oxHDL3作用24h組減少最明顯,較0mg/L oxHDL3分別下降了34%和35%(均P<0.05);免疫細胞化學(xué)結(jié)果顯示,與對照組和HDL3(80mg/L)組相比,oxHDL3(80mg/L)組t-PA蛋白的表達有所

4、下降,較對照組下降了40%,而較HDL3(80mg/L)組下降了42%(均P<0.05),與對照組相比, HDL3組t-PA表達沒有明顯變化。
　　2.與對照組和HDL3組相比、oxHDL3(40、80mg/L)組Phospho-p38 MAPK的水平增加且細胞核內(nèi)NF-κB p65的量也有所增加,與對照組相比,oxHDL3(80mg/L)組Phospho-p38 MAPK的水平增加了40%,核內(nèi)NF-κBp65的量增加了45%(

5、P<0.05),與HDL3(80mg/L)組相比,oxHDL3(80mg/L)組Phospho-p38 MAPK的水平及細胞核內(nèi)NF-κBp65的量分別增加了22%和31%(均P<0.05)。
　　3.采用p38 MAPK抑制劑(SB203580)與NF-κB抑制劑(BAY11-7085)預(yù)先處理后,oxHDL3抑制t-PA mRNA及蛋白表達的作用有所下降,與oxHDL3(80mg/L)組相比,t-PA mRNA的表達分別增加了