移植胰島血管內(nèi)皮細(xì)胞Nephrin、AAT表達(dá)的實驗研究.pdf

1、目的：研究Nephrin、α1抗胰蛋白酶(α1-Antitrypsin AAT)在胰島移植物微血管內(nèi)皮細(xì)胞的表達(dá)情況。 方法：采用原位胰管灌注膠原酶消化胰腺并用Ficoll梯度離心純化，獲取供移植的SD大鼠胰島。將獲得的胰島經(jīng)門靜脈注射移植于糖尿病模型SD大鼠肝內(nèi)，術(shù)后給予免疫抑制劑FK506(0.1 mg·kg<'-1>·d<'-1>)、MMF(40mg·kg<'-1>·d<'-1>)灌胃。通過用血糖檢測儀監(jiān)測受體大鼠靜脈血糖

2、，判斷胰島在受體內(nèi)的功能。受體隨機(jī)分為四組(ABCD)，術(shù)后7天，14天，40天，60天分別處死大鼠。用免疫組化研究AAT、Nephrin在原位胰島及胰島移植物微血管內(nèi)皮細(xì)胞的表達(dá)情況。 結(jié)果: 1．胰腺經(jīng)膠原酶消化及Ficoll純化后，胰島收獲量為662.33±148.05胰島/胰，純度85％，活率在92％以上。 2．胰島移植后沒有發(fā)生嚴(yán)重的免疫排斥反應(yīng)，大鼠血糖在術(shù)后3-5天恢復(fù)正常。移植后可在肝臟門脈系統(tǒng)內(nèi)

3、見到較多形態(tài)完好的胰島。 3．結(jié)果分析表明各組胰島血管內(nèi)皮細(xì)胞有AAT表達(dá)。各組的AAT陽性細(xì)胞表達(dá)(面積密度值)：原位胰島組0.0673±0.0132，A組0.0627±0.0107，B組0.0542±0.0113，C組0.0479±0.0095，D組0.0364±0.0087，各組間的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。 4．結(jié)果分析表明各組胰島血管內(nèi)皮細(xì)胞也有Nephrin表達(dá)。各組陽性細(xì)胞表達(dá)(面積密度值)：原位

4、胰島0.0593±0.0124，A組0.0541±0.0093，B組0.0497±0.0072，C組0.0396±0.0081，D組0.0368±0.0053，各組間的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0．05)。 結(jié)論： 1．用膠原酶灌注消化、密度梯度離心能夠獲得活度較高的胰島移植物。 2．FK506和MMF聯(lián)用能夠較好的抑制免疫排斥反應(yīng)，胰島移植物能夠長期存活并發(fā)揮內(nèi)分泌功能。 3．供體胰島血管內(nèi)皮細(xì)胞參與了胰