神經(jīng)生長因子及酪氨酸激酶受體A在宮內(nèi)發(fā)育遲緩大鼠腦內(nèi)表達(dá)的研究.pdf

1、目的：
　　 胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩（intrauterine growth retardation，IUGR）又稱為胎兒生長受限（FGR），是指孕37周后，胎兒出生體重＜2500 g，或低于同孕齡、同性別平均體重的兩個標(biāo)準(zhǔn)差，或低于正常體重的10個百分位數(shù)以下的新生兒。IUGR是導(dǎo)致神經(jīng)發(fā)育異常的高危因素，可引起神經(jīng)生物學(xué)，認(rèn)知功能，記憶等方面的功能障礙，我國IUGR的發(fā)病率平均為（6.39-16.3）％。IUGR是產(chǎn)科嚴(yán)重的并發(fā)癥

2、，是圍生兒死亡的重要原因之一，其圍生兒病死率為正常兒的8倍。神經(jīng)生長因子（NGF）是由多種細(xì)胞分泌的具有廣泛生理作用的多肽，對發(fā)育中的神經(jīng)元的存活、分化、成熟以及整個生命的過程都起著廣泛的作用，它通過與高親和力受體酪氨酸激酶受體A（TrkA）的作用，促進(jìn)神經(jīng)元的分化、存活、突觸形成及改善學(xué)習(xí)記憶等功能。本研究通過孕期全程低蛋白飲食的方法建立宮內(nèi)發(fā)育遲緩的動物模型，觀察神經(jīng)生長因子及酪氨酸激酶受體A在宮內(nèi)發(fā)育遲緩大鼠腦中不同發(fā)育階段的變化

3、，探討IYGR大鼠腦發(fā)育遲緩的機(jī)制。
　　 方法：
　　 1、實驗動物選用中國醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供的8-10周的Wistar大鼠，用孕期全程低蛋白飲食的方法建立IUGR實驗動物模型，對照組飼以正常飲食，IUGR的判斷標(biāo)準(zhǔn)為新生鼠出生體重低于正常對照組新生鼠出生體重的2個標(biāo)準(zhǔn)差的為IUGR鼠。
　　 2、將研究對象隨機(jī)分為0天組、7天組、14天組、21天組，分別計量各組實驗動物的體重、腦重。
　　 3、

4、用HE染色的方法觀察實驗組、對照組各階段仔鼠的腦組織的病理特征，用尼氏染色的方法觀察實驗組、對照組各階段仔鼠的神經(jīng)元中尼氏體的表達(dá)情況。
　　 4、用免疫組化ABC法觀察不同生長發(fā)育階段的IUGR鼠的腦皮質(zhì)內(nèi)NGF及TrkA的表達(dá)改變情況。
　　 5、用Western blot方法檢測不同生長發(fā)育階段的IUGR鼠的腦內(nèi)NGF和TrkA蛋白的表達(dá)改變情況。
　　 結(jié)果：
　　 1、低蛋白組IUGR發(fā)生率為5

5、5.77％（29/52只），明顯高于正常飲食組的9.43％（5/53只），差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 2、低蛋白飲食組的死胎率為23.08％（12/52只），明顯高于正常飲食組的5.66％（3/53只），差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 3、正常飲食組仔鼠0天體重為（5.1868±0.4329）g，IUGR組仔鼠0天體重為（4.2133±0.6445）g，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 4、低蛋白飲食組仔鼠0天、7天、14天、2

6、1天組的腦重較正常飲食組均顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 5、Western blot結(jié)果顯示低蛋白飲食組0天、7天、14天、21天組的仔鼠腦內(nèi)NGF和TrkA蛋白的表達(dá)較正常飲食組均顯著降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)論：
　　 1、孕期全程低蛋白飲食是良好的IUGR造模方法，模型建立穩(wěn)定、可靠。
　　 2、低蛋白飲食組仔鼠腦重的降低可能會持續(xù)相當(dāng)長的一段時間。
　　 3、NGF和TrkA