草原老鸛草質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與有效成分提取工藝研究.pdf_第1頁(yè)
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1、草原老鸛草(Geranium pretense L.)為牻牛兒苗科老鸛草屬植物,為傳統(tǒng)常用藏藥材,藏語(yǔ)音譯為拉崗,異名喀圖曼巴、辛木頭勒曼巴等。草原老鸛草為非正品藥材,《中國(guó)藥典》和《藏藥部頒》未收載,收載于《中華本草·藏藥卷》,而《藏藥志》中已有記載。它主要生長(zhǎng)在海拔2600~4000米的灌木草叢、高山草甸、林下或河邊草地,分布于四川西北部,西藏東北部和青海東南部。草原老鸛草具有利肺祛風(fēng),止瀉消炎,解毒排膿的功效,用于腸炎、腹瀉、傷寒

2、、音閉、消化不良等癥狀。
  本文對(duì)草原老鸛草進(jìn)行了本草考證,并從植物的宏觀形態(tài)和莖、葉柄、葉的微觀組織構(gòu)造以及粉末特征上對(duì)草原老鸛草進(jìn)行了系統(tǒng)的生藥學(xué)鑒別,得到草原老鸛草植物葉片,掌狀7~9深裂近莖部,裂片菱形或狹菱形;解剖學(xué)特征上,草原老鸛草莖的厚壁細(xì)胞環(huán)帶,由11~12層細(xì)胞構(gòu)成,葉柄的厚壁細(xì)胞環(huán)帶,由5~6層細(xì)胞構(gòu)成;粉末特征上,花萼上有大量的毛茸,這些藥材性狀、解剖學(xué)特征和粉末特征是草原老鸛草與其它老鸛草植物的區(qū)別所在。

3、本文以莽草酸和沒(méi)食子酸為對(duì)照品對(duì)草原老鸛草的TLC鑒別條件進(jìn)行了優(yōu)化并對(duì)9批樣品進(jìn)行了TLC定性鑒別,得到以二氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(3∶4.5∶0.5∶1)和環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸(8∶6∶1)為展開劑,濕度為40%~80%,莽草酸和沒(méi)食子酸與其它組分很好分離,Rf分別為0.51和0.39,同時(shí)測(cè)定了藥材的水分、總灰分及酸不溶性灰分等理化指標(biāo),結(jié)果水分9.80%~11.19%,總灰分9.94%~12.23%,酸不溶性灰分1.83

4、%~2.41%。
  本文以莽草酸和沒(méi)食子酸為指標(biāo)成分,建立了HPLC法測(cè)定草原老鸛草中莽草酸和沒(méi)食子酸含量的方法,結(jié)果表明此方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確靈敏,莽草酸和沒(méi)食子酸的線性回歸方程分別為y=42250x+17303,r=0.9995;y=3.5946×106x-21568,r=0.9999;線性范圍分別為124.5~1992.0μg,0.064~0.448μg;平均回收率分別為99.74%,102.96%;RSD分別為1.68%

5、,0.58%,在此條件下,測(cè)定了9批自采草原老鸛草樣品莽草酸和沒(méi)食子酸的含量,結(jié)果為莽草酸含量為0.16%~0.23%,沒(méi)食子酸含量為0.18%~0.38%。
  在上述工作基礎(chǔ)上,本文擬定了草原老鸛草質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案,初步擬定草原老鸛草藥材按干燥品計(jì)算,莽草酸含量不得低于0.15%,沒(méi)食子酸含量不得低于0.20%;藥材水分不得過(guò)12.0%,總灰分不得過(guò)12.0%,酸不溶性灰分不得過(guò)3.0%。
  本文還以沒(méi)食子酸為對(duì)照品,采用

6、磷鉬鎢酸-干酪素為顯色劑,建立了紫外可見最大吸收波長(zhǎng)分光光度法測(cè)定川西老鸛草中總鞣質(zhì)含量的方法,結(jié)果表明此方法快速,簡(jiǎn)便,準(zhǔn)確靈敏,沒(méi)食子酸線性回歸方程為y=112.28x+0.0081,r=0.9998,平均回收率為99.29%,RSD為1.22%,運(yùn)用此方法測(cè)定川西老鸛草中鞣質(zhì)的含量為8.70mg·g-1。此法不僅作為川西老鸛草中鞣質(zhì)提取工藝評(píng)價(jià)指標(biāo)含量的測(cè)定方法,同時(shí)也為其它藥用植物鞣質(zhì)含量測(cè)定提供可借鑒經(jīng)驗(yàn)和理論依據(jù)。
 

7、 本文利用正交實(shí)驗(yàn)法,以鞣質(zhì)提取率為評(píng)價(jià)指標(biāo),對(duì)川西老鸛草中鞣質(zhì)傳統(tǒng)的醇提工藝條件進(jìn)行了優(yōu)化,得到優(yōu)選的工藝條件為用8倍量70%乙醇回流提取3次,每次提取1.0h,鞣質(zhì)提取率為84.95%,浸膏得率為10.20%,浸膏中鞣質(zhì)的含量為7.23%。
  本文還探討了超臨界CO2萃取川西老鸛草中鞣質(zhì)的工藝條件,對(duì)影響超臨界萃取主要因素進(jìn)行了考察,同時(shí)以鞣質(zhì)含量為評(píng)價(jià)指標(biāo),分別考察萃取壓力、萃取溫度、萃取時(shí)間和CO2流量對(duì)鞣質(zhì)萃取效果的影

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