川貝母有效成分提取工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究.pdf

1、貝母 Frritillaira為百合科Liliaceae貝母屬.FritillariaL.植物的干燥鱗莖，是常見(jiàn)的中藥材之一，收錄于《中國(guó)藥典》2005版一部。貝母在我國(guó)有悠久的使用歷史，有清熱潤(rùn)肺，化痰止咳之功效，主治肺熱燥咳、咯痰帶血、痰多胸悶等癥。 本論文首先研究了川貝母中有效成分生物堿和皂苷的最佳提取工藝。以貝母總生物堿為指標(biāo)，采用單因素考察了藥材粒度，再用正交試驗(yàn)考察了提取時(shí)間、提取次數(shù)、料液比對(duì)貝母類藥材總生物堿提取

2、的影響，最終確定最佳提取工藝為：時(shí)間24小時(shí)、料液比40ml、提取次數(shù)2次；采用超臨界C02流體提取技術(shù)提取川貝母游離生物堿，選取萃取壓力、萃取溫度、萃取時(shí)間和夾帶劑用量作為考察條件進(jìn)行單因素試驗(yàn)，在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，再通過(guò)正交試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示C02萃取川貝母游離生物堿的最佳萃取條件為：萃取壓力20MPa，乙醇用量300ml，萃取時(shí)間2h，萃取溫度45℃；采用乙醇(甲醇)索式法、乙醚(丙酮)沉淀法提取貝母總皂苷。選取藥材粒度、提取時(shí)

3、間、甲醇濃度三因素，通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)確定了提取總皂苷最佳工藝，結(jié)果顯示最佳提取條件為提取時(shí)間為8小時(shí)，粒度為100目，甲醇濃度100％。 本論文還對(duì)川貝母的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了探討，分別測(cè)定了貝母類藥材的微量元素，采用二極管陣列一高效液相色譜的方法初步構(gòu)建貝母類藥材的指紋圖譜，并利用分子生物學(xué)標(biāo)記技術(shù)探索了川貝母的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)中利用火焰(石墨爐)原子吸收分光光度儀和定碳、定硫儀對(duì)10種不同產(chǎn)地、品種的貝母中16種微量元素進(jìn)行了測(cè)定。以測(cè)

4、定結(jié)果含量為指標(biāo)，提取特征因子，再利用特征因子作聚類分析。結(jié)果表明微量元素，與中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)有相關(guān)性；實(shí)驗(yàn)還對(duì)8種不同品種、產(chǎn)地的貝母作了高效液相色譜分析，通過(guò)檢測(cè)其主要成分生物堿的含量來(lái)評(píng)價(jià)其質(zhì)量。以貝母素甲為標(biāo)準(zhǔn)品，采用外標(biāo)法，并對(duì)8種貝母藥材進(jìn)行柱前衍生化處理，檢測(cè)貝母中生物堿并做出分析。本研究初步建立了川貝母的指紋圖譜，為川貝母的品種鑒定和質(zhì)量評(píng)價(jià)提供一定的參考；采用用隨機(jī)片段多態(tài)性DNA(RAPD)的方法擴(kuò)增了8個(gè)貝母樣品總DN