腦膠質(zhì)瘤MGMT基因啟動(dòng)子甲基化及蛋白表達(dá)研究.pdf

1、目的：MGMT基因啟動(dòng)子區(qū)的過甲基化可導(dǎo)致MGMT基因的轉(zhuǎn)錄失活，本研究擬初步探討腦膠質(zhì)瘤中MGMT基因啟動(dòng)子甲基化及其蛋白表達(dá)與腫瘤發(fā)生和進(jìn)展的關(guān)系。并探討MGMT基因甲基化作為膠質(zhì)瘤個(gè)體化治療靶點(diǎn)的依據(jù)。
　　 方法：膠質(zhì)瘤SHG-44細(xì)胞株及其干細(xì)胞培養(yǎng)、鑒定。逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(Reversetranscriptase polymerase chain reactioN,RT-PCR)方法檢測SHG-44細(xì)胞株及腦腫瘤干

2、細(xì)胞中MGMT基因mRNA表達(dá)情況。甲基化特異性PCR (methylation-specific PCR，MSP)方法檢測49例腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本及膠質(zhì)瘤細(xì)胞MGMT基因啟動(dòng)子甲基化情況。免疫組織化學(xué)(Envision兩步法)方法檢測腦膠質(zhì)瘤MGMT蛋白表達(dá)及P53蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果：膠質(zhì)瘤SHG-44細(xì)胞株及其干細(xì)胞培養(yǎng)、鑒定成功，腦腫瘤干細(xì)胞(brain tumorstem cell，BTSC)CD133陽性。SHG-44細(xì)

3、胞株存在MGMT基因啟動(dòng)子過甲基化，mRNA表達(dá)缺失，而BTSC MGMT基因啟動(dòng)子未見甲基化，其mRNA表達(dá)陽性。49例腦膠質(zhì)瘤患者中，MGMT基因啟動(dòng)子甲基化陽性者26例占53.06％(26/49)。腦膠質(zhì)瘤病理分級(jí)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級(jí)MGMT基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化陽性率分別為45.45％、50.0％、72.72％，各組問無顯著性差異（p=0.32）。腦膠質(zhì)瘤MGMT基因啟動(dòng)子甲基化陽性率男性55.55％，女性50.0％，兩組問無顯著性差異(P

4、=0.698)。>50年齡組、50腦膠質(zhì)瘤患者M(jìn)GMT基因啟動(dòng)子甲基化陽性率為分別為61.53％、50.0％，兩年齡組間甲基化陽性率無顯著性差異(P=0.475)。49例腦膠質(zhì)瘤MGMT蛋白表達(dá)陽性率為55.10％ (27/49)。腦膠質(zhì)瘤病理分級(jí)Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級(jí)MGMT蛋白表達(dá)陽性率分別為59.09％、50.0％、45.45％，各組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.754)，MGMT蛋白表達(dá)與性別、年齡組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.517、P=

5、0.915)。49例腦膠質(zhì)瘤中，27例MGMT表達(dá)陽性的組織中8例甲基化陽性；22例MGMT表達(dá)陰性的組織中，18例甲基化陽性，腦膠質(zhì)瘤MGMT基因啟動(dòng)子甲基化與蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.520，p<0.05)。27例MC3MT蛋白表達(dá)陽性的組織中7例P53蛋白表達(dá)陽性；22例MGMT蛋白表達(dá)陰性的組織中，12例P53蛋白表達(dá)陽性，膠質(zhì)瘤組織MGMT與053的表達(dá)呈負(fù)的相關(guān)關(guān)系(1=-0.292，P<0.05)。
　　 結(jié)論：