人類腦膠質瘤MGMT基因啟動子區(qū)甲基化作用研究.pdf

1、目的：研究人類腦膠質瘤MGMT（O6-甲基鳥嘌呤-DNA-甲基轉移酶）基因啟動子區(qū)甲基化與該基因表達及腦膠質瘤細胞對化療藥物敏感性三者之間的關系。 方法：取人腦膠質瘤u251細胞系，實驗分5-aza-2'-deoxycytidine（5azadC）未處理組和處理組，行細胞的培養(yǎng)、傳代，分別提取未處理組細胞和處理組細胞的RNA、行RT-PCR對比驗證MGMT基因的表達量的變化并以MSP（甲基化特異性的PCR）方法檢測未處理組MGM

2、T基因啟動子區(qū)甲基化程度。按5azadC處理前后兩組細胞分別聯(lián)合應用順鉑或替莫唑胺，以流式細胞儀檢測各組細胞凋亡情況。 結果：MSP驗證了人腦膠質瘤u251細胞MGMT基因存在啟動子區(qū)的部分甲基化的現(xiàn)象。5azadC去甲基化處理組較未處理組MGMT基因表達量得到了明顯的恢復。體外藥敏試驗中發(fā)現(xiàn)5azadC與替莫唑胺聯(lián)合使用（MGMT基因的表達上調）使得人腦u251膠質瘤細胞對替莫唑胺脫敏，而5azadC與順鉑的聯(lián)合表現(xiàn)為對u25