PSMA及其新型變異體PSMA5在前列腺癌診斷中的應(yīng)用.pdf

1、本文擬建立一種可以定量檢測(cè)PSMA及其變異體PSMA5的實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-timefluorescentquantitativePCR，real-timeFQ-PCR)的方法，檢測(cè)PSMA及其變異體在不同前列腺疾病中的表達(dá)差異，并對(duì)其臨床意義進(jìn)行初步探討，為深入研究前列腺癌的新型、特異、敏感的前列腺癌的診斷標(biāo)志物提供新的思路和理論依據(jù)。探索PSMA及其變異體在前列腺癌臨床診斷中的臨床應(yīng)用。 研究材料與方法：從泌尿系腫

2、瘤細(xì)胞株和其它腫瘤細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)株、前列腺癌組織、前列腺增生組織、前列腺正常組織及前列腺癌、前列腺增生患者外周血單個(gè)核細(xì)胞和血漿中提取總的RNA，逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。根據(jù)PSMA及其變異體PSMA5的共同序列設(shè)計(jì)一對(duì)通用引物Ptotal，再針對(duì)PSMA及PSMA5變異體設(shè)計(jì)各自特異引物，分別用Pwild和P5表示。然后用這三對(duì)引物對(duì)以上所收集的標(biāo)本和材料做實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析。比較PSMA及PSMA5在不同組織中以及不同前列腺疾病中的表達(dá)情

3、況。 研究結(jié)果與討論：采用自行設(shè)計(jì)的三對(duì)引物Ptotal、Pwild及P5在前列腺癌LNCap細(xì)胞株上用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法可以擴(kuò)增出特異的產(chǎn)物。并對(duì)不同的腫瘤細(xì)胞株、不同的前列腺組織及不同的前列腺病例外周血細(xì)胞和血漿進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)。定量分析的結(jié)果顯示PSAM及PSMA5具有較好的前列腺組織特異性及病變特異性，尤其是PSMA5具有更好的前列腺組織特異性，有望成為臨床診斷和治療前列腺癌的靶點(diǎn)，對(duì)PSMA5的研究拓展了

4、前列腺癌的研究思路，顯示出其良好的應(yīng)用前景。 研究結(jié)論： 1.首先建立能定量區(qū)別PSMA野生型和PSMA5的PCR方法，為變異體的研究提供一個(gè)良好的技術(shù)平臺(tái)。 2.通過(guò)應(yīng)用熒光定量PCR方法，從定性到定量水平證實(shí)PSMA5的組織特異性和病變特異性，是一個(gè)更好的前列腺癌研究的生物學(xué)標(biāo)志和靶點(diǎn)。 3.首次應(yīng)用熒光定量PCR方法檢測(cè)外周血PSMA野生型和PSMA5的表達(dá)，PSMA5各項(xiàng)指標(biāo)都優(yōu)于一直沿用的PSA